Question

【題目】環(huán)境污染物多聚聯(lián)苯難以降解，受其污染的土壤中常同時存在重金屬污染。研究發(fā)現(xiàn)聯(lián)苯降解菌內(nèi)的聯(lián)苯水解酶是催化多聚聯(lián)苯降解的關(guān)鍵酶。回答下列問題：

（1）為了從富含多聚聯(lián)苯的環(huán)境中分離聯(lián)苯降解菌，培養(yǎng)基中加入多聚聯(lián)苯作為____________，該培養(yǎng)基屬于____________（填“選擇”或“鑒定”）培養(yǎng)基。用平板劃線法純化該細(xì)菌時，第1次劃線及其以后劃線總是從上次劃線的末端開始是為了____________。

（2）為了能夠反復(fù)利用聯(lián)苯水解酶，可以采用____________技術(shù)，該技術(shù)的另一個優(yōu)點是___________。

（3）若從聯(lián)苯降解菌中分離并得到純度較高的聯(lián)苯水解酶，純化該酶常用的方法是____________，采用該方法先分離出分子質(zhì)量____________的蛋白質(zhì)。

（4）下圖中實線表示聯(lián)苯水解酶催化的反應(yīng)速度與酶濃度的關(guān)系，虛線表示在其他條件不變的情況下，底物濃度增加一倍，反應(yīng)速度與酶濃度的關(guān)系，能正確表示兩者關(guān)系的是____________。

Answer 1

【答案】（唯一）碳源 選擇 將聚集的菌體逐漸稀釋以便獲得單個菌落 固定化酶 提高產(chǎn)物的純度 凝膠色譜法 較大 B

【解析】

微生物的培養(yǎng)基按功能分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基；固定化酶是指用物理學(xué)或化學(xué)的方法將酶與固相載體結(jié)合在一起形成的仍具有酶活性的酶復(fù)合物，在催化反應(yīng)中，它以固相狀態(tài)作用于底物，反應(yīng)完成后，容易與水溶性反應(yīng)物和產(chǎn)物分離，可被反復(fù)使用；凝膠色譜法的原理：凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì)的有效方法，相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程長，移動的速度慢，相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動的速度快，因此相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)得以分離。

（1）為了從富含多聚聯(lián)苯的環(huán)境中分離聯(lián)苯降解菌，應(yīng)該用以多聚聯(lián)苯作為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基；用平板劃線法純化該細(xì)菌時，在進(jìn)行第二次以及其后的劃線操作時要從上一次劃線的末端開始劃線，因為每次劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落。

（2）為了能夠反復(fù)利用聯(lián)苯水解酶，可以采用固定化酶技術(shù)，該技術(shù)可使酶與產(chǎn)物分開，因此提高了產(chǎn)物的純度。

（3）純化該酶常用的方法是凝膠色譜法，該方法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì)的有效方法，相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程長，移動的速度慢，相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動的速度快，因此采用該方法先分離出分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)。

（4）根據(jù)題意分析，開始時酶不夠，底物加不加倍都不能增加反應(yīng)的速率；隨著酶濃度增大，反應(yīng)速率才有區(qū)分，故選B。