Question

【題目】某種物質S（一種含有C、H、N的有機物）難以降解，會對環(huán)境造成污染，只有某些細菌能降解S。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細菌菌株。實驗過程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無機鹽、水和S，乙的組分為無機鹽、水、S和Y。

回答下列問題：

（1）實驗時，盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶通常采用_______________的方法進行滅菌。乙培養(yǎng)基中的Y物質是_______________。甲、乙培養(yǎng)基均屬于______________培養(yǎng)基。

（2）實驗中初步估測搖瓶M中細菌細胞數(shù)為2×107 個/mL，若要在每個平板上涂布100μL稀釋后的菌液，且保證每個平板上長出的菌落數(shù)不超過200個，則至少應將搖瓶M中的菌液稀釋________________倍。

（3）在步驟⑤的篩選過程中，發(fā)現(xiàn)當培養(yǎng)基中的S超過某一濃度時，某菌株對S的降解量反而下降，其原因可能是________________（答出1點即可）。

（4）若要測定淤泥中能降解S的細菌細胞數(shù)，請寫出主要實驗步驟________________。

（5）上述實驗中，甲、乙兩種培養(yǎng)基所含有的組分雖然不同，但都能為細菌的生長提供4類營養(yǎng)物質，即________________。

Answer 1

【答案】高壓蒸汽滅菌 瓊脂 選擇 104 S的濃度超過某一值時會抑制菌株的生長 取淤泥加入無菌水，涂布（或稀釋涂布）到乙培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后計數(shù) 水、碳源、氮源和無機鹽

【解析】

培養(yǎng)基一般含有水、碳源、氮源、無機鹽等。
常用的接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。
常用的滅菌方法：干熱滅菌法、灼燒滅菌法、高壓蒸汽滅菌法。

（1）常用高壓蒸汽滅菌法處理盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶，乙為固體培養(yǎng)基，故需要加入Y瓊脂；甲和乙培養(yǎng)基可以用于篩選能降解S的菌株，故均屬于選擇培養(yǎng)基。
（2）若要在每個平板上涂布100μL稀釋液后的菌液，且每個平板上長出的菌落數(shù)不超過200個，則搖瓶M中的菌液稀釋的倍數(shù)至少為2×107÷1000×100÷200=1×104倍。
（3）當培養(yǎng)基中的S超過某一濃度后，可能會抑制菌株的生長，從而造成其對S的降解量下降。
（4）要測定淤泥中能降解S的細菌的細胞數(shù)，可以取淤泥加無菌水制成菌懸液，稀釋涂布到乙培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后進行計數(shù)。
（5）甲和乙培養(yǎng)基均含有水、無機鹽、碳源、氮源。