Question

【題目】回答與植物克隆和動物克隆有關(guān)的問題：

研究人員欲利用抗蟲基因，通過基因工程培育抗蟲植物。圖1和圖2分別表示了抗蟲基因和農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的限制性核酸內(nèi)切酶識別位點和抗生素抗性基因（PstⅠ、SmaⅠ、AluⅠ表示限制性核酸內(nèi)切酶切割位點；amp為氨芐青霉素抗性基因，tet為四環(huán)素抗性基因）

請回答：

（1）為獲得大量抗蟲基因，且保證形成重組質(zhì)粒時，目的基因以唯一方向接入，可選用______（填限制性核酸內(nèi)切酶的種類）分別切割目的基因和Ti質(zhì)粒，再用DNA連接酶連接，形成重組DNA分子，再與經(jīng)過______處理的______（A．有amp和tet B．有amp，無tet C．無amp，有tet D．無amp和tet）的農(nóng)桿菌液混合，使重組DNA進入農(nóng)桿菌，再利用農(nóng)桿菌將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞并整合到細(xì)胞DNA中。

（2）抗蟲基因亦可通過______方法導(dǎo)入植物細(xì)胞，抗蟲基因進入細(xì)胞后，可利用______整合到植物細(xì)胞DNA中。

（3）將含有導(dǎo)入了目的基因的愈傷組織試管放在______上，進行液體懸浮培養(yǎng)獲得______，進而培育成抗蟲植株

Answer 1

【答案】SmaI和PstI CaCl2 D 顯微注射 轉(zhuǎn)座因子 搖床 胚性細(xì)胞

【解析】

1、由題干信息“PstⅠ、SmaⅠ、AluⅠ表示限制性核酸內(nèi)切酶切割位點”，不能選用AluⅠ，這樣會破壞目的基因。

2、標(biāo)記基因的作用是：為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。

（1）分析圖一可知，獲取目的基因可用限制酶SmaI和PstI或只使用PstI，切割質(zhì)粒時必需保證標(biāo)記基因不能全部被破壞，因此為獲得大量抗蟲基因，且保證形成重組質(zhì)粒時，目的基因以唯一方向接入，可選用Sma I和PstI分別切割目的基因和Ti質(zhì)粒，再用DNA連接酶連接，形成重組DNA分子，此時的重組DNA分子中的標(biāo)記基因為amp；再與經(jīng)過CaCl2處理（使其成為感受態(tài)細(xì)胞）的無amp和tet的農(nóng)桿菌液混合，使重組DNA進入農(nóng)桿菌。再利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入培養(yǎng)的玫瑰細(xì)胞，使目的基因?qū)�入玫瑰�?xì)胞中。

（2）抗蟲基因亦可通過顯微注射方法導(dǎo)入植物細(xì)胞，抗蟲基因進入細(xì)胞后，可利用轉(zhuǎn)座因子整合到植物細(xì)胞DNA中。

（3）將含有導(dǎo)入了目的基因的玫瑰細(xì)胞的試管放在搖床上震蕩，進行液體懸浮培養(yǎng)獲得胚性細(xì)胞，進而培育成抗蟲玫瑰，原理是植物細(xì)胞具有全能性