Question

【題目】【生物一選修1生物技術實踐】某同學要分離土壤中能分解尿素的細菌，并統(tǒng)計每克土壤樣品中活菌數目，培養(yǎng)基配方如下。將各種物質溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL，再經高溫滅菌，制成固體培養(yǎng)基備用。

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO47H2O	蛋白胨	葡萄糖	尿素	瓊脂
1．4 g	2．1 g	0．2 g	1．0 g	10．0 g	1．0 g	15．0 g

（1）根據培養(yǎng)基的成分判斷，該同學能否分離出土壤中分解尿素的細菌？________（填“能”或“不能”），原因是_________________。

（2）培養(yǎng)基用________方法滅菌，培養(yǎng)皿用________方法滅菌，待培養(yǎng)基冷卻到________℃（填“20”、“30”、“40”或“50”）左右時，在________附近倒平板，等平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，可以防止________，以免造成污染。

（3）要統(tǒng)計每克土壤樣品中活菌數目，宜采用________法接種，根據土壤樣品的稀釋倍數和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計平板上的________就能大約推測出樣品中活菌數。

（4）培養(yǎng)分解尿素的細菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是_______________。

（5）實驗中使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經過________處理后才能丟棄，以防止微生物的擴散。

Answer 1

【答案】（1）不能 培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物（培養(yǎng)基含蛋白胨，蛋白胨中含有氮元素）

（2）高壓蒸汽滅菌 干熱滅菌 50 酒精燈火焰 培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基

（3）（稀釋）涂布平板 菌落數目

（4）將未接種的培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產生

（5）滅菌

【解析】（1）據表分析，表中的蛋白胨可以為微生物的生存提供氮源，尿素不是唯一氮源，所以不能選擇出只以尿素為氮源的微生物。

（2）培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌；培養(yǎng)皿耐高溫，可以采用干熱滅菌；培養(yǎng)基溫度過低會凝固，所以在50℃左右開始倒平板；倒平板時要無菌操作，一般在酒精燈火焰附近操作；培養(yǎng)基倒置能防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，以免造成污染。

（3）要統(tǒng)計每克土壤樣品中“活菌”數目，說明應采用稀釋涂布平板計數法；一般認為每個細菌能增殖為一個菌落，根據菌落數目即可統(tǒng)計活菌數目。

（4）檢測培養(yǎng)基是否被污染的方法一般是：將未接種的培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產生。

（5）為防止微生物污染環(huán)境和操作者，實驗結束后，使用過的培養(yǎng)基應該進行滅菌后才能丟棄。