Question

（8分）菊天牛是菊花的主要害蟲之一�？蒲腥藛T將抗蟲基因轉入菊花，培育出抗蟲菊花。下圖是獲得轉基因菊花的技術流程，請據圖回答：

（注：卡那霉素抗性基因（kan^R）作為標記基因，菊花葉片對卡那霉素高度敏感。）

（1）為了促進土壤農桿菌吸收重組質粒，可用______________處理土壤農桿菌，使其處于感受態(tài)。

（2）將重組質粒導入土壤農桿菌的目的是利用農桿菌能夠_______________________的特點，使目的基因進入受體細胞中，并插入到菊花細胞的_______________上，最終形成轉基因植株。

（3）將愈傷組織轉移到添加一定濃度植物激素和_____________的培養(yǎng)基中，在適宜條件下進行培養(yǎng)，篩選轉基因菊花。

（4）用PCR方法檢測轉基因菊花是否含有目的基因時，需根據________________的核苷酸序列設計特異引物，以________________為模板進行第一輪擴增。

（5）將轉基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料以適當比例混合后飼喂菊天牛2 齡幼蟲，實驗結果如下表所示。

組別	死亡率（%）
實驗組	轉基因植株1	60.00
轉基因植株2	53.33
對照組	13.33

 

 

 

 

 

①對照組應飼喂等量的_______________________________。

②據表分析，______________________________差異顯著，說明轉基因菊花對菊天牛2齡幼蟲有較強的毒殺作用。

 

Answer 1

【答案】

 

（1）Ca²⁺（或“CaCl₂”） 

（2）感染菊花（或“植物”）細胞，并將T-DNA轉移至受體細胞    染色體DNA

（3）卡那霉素

（4）抗蟲基因（目的基因）    轉基因菊花的DNA（或“含目的基因的菊花DNA”）

（5）①非轉基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料混合物     ②實驗組與對照組死亡率

【解析】

試題分析：⑴通常用鈣離子處理細菌，使之處于感受態(tài) ⑵根據農桿菌的Ti質粒中的T—DNA可以整合到受體細胞的染色體DNA上的特點，通常用農桿菌轉化法將目的基因導入受體細胞 ⑶基因表達載體的構建中，需要標記基因，根據題意可知該標記基因為卡那霉素，因此需要在加入卡那霉素的培養(yǎng)基中選擇出成功轉入目的基因的菊花 ⑷利用PCR技術擴增目的基因時，需要根據目的基因的脫氧核苷酸序列設計引物，同時利用含有目的基因的DNA為模板進行擴增  ⑸實驗設計遵循對照原則，因此對照組應該加入非轉基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料混合物；根據實驗組比對照組的死亡率高，說明轉基因菊花對菊天牛2齡幼蟲有較強的毒殺作用。

考點：本題主要考查基因工程，意在考查考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯系，形成知識的網絡結構的能力。