Question

【題目】真核生物基因中通常含有內含子，而原核生物基因中沒有，原核生物沒有真核生物所具有的切除內含子對應的RNA序列的機制。下圖表示從基因文庫提取胰島素基因的過程，回答下列問題：

（1）過程①用到的酶為_______________________，與基因組文庫中的基因相比，cDNA文庫中獲得的目的基因 _____________(填“不含有”或“含有”)啟動子。

（2）過程②的目的是__________________。

（3）過程⑤需將纖維素膜上的細菌___________，釋放出DNA，再用32P標記的__________作為探針進行雜交。依據(jù)雜交結果，應選取培養(yǎng)基上___________(填字母）菌落繼續(xù)培養(yǎng)，才能獲得含有膜島素基因的受體菌。

（4）與從基因組文庫獲取目的基因相比，圖示方法獲得的目的基因在受體菌中更容易表達，原因是______。

Answer 1

【答案】 逆轉錄酶 不含有 使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并遺傳給后代，同時使目的基因能夠表達并發(fā)揮作用 裂解 目的基因（或胰島素基因） a cDNA中不含有內含子，轉錄出的RNA不需要經(jīng)過加工，可直接作為合成蛋白質的模板

【解析】試題分析：據(jù)圖分析，過程①表示逆轉錄過程，需要逆轉錄酶的催化；過程②表示基因表達載體的構建；過程③表示將目的基因導入受體細胞；過程④表示將細菌轉移到纖維素膜上；過程⑤表示目的基因的檢測。

（1）根據(jù)以上分析已知，過程①表示逆轉錄過程，需要逆轉錄酶的催化；該過程獲得cDNA為部分基因文庫，由于其中目的基因是mRNA逆轉錄形成的，不含有啟動子。

（2）過程②表示基因表達載體的構建，目的是使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并遺傳給后代，同時使目的基因能夠表達并發(fā)揮作用。

（3）過程⑤需將纖維素膜上的細菌裂解，釋放出DNA，再用32P標記的目的基因作為探針進行雜交。依據(jù)雜交結果中雜交帶出現(xiàn)的位置可知，應選取培養(yǎng)基上a菌落繼續(xù)培養(yǎng)，才能獲得含有膜島素基因的受體菌。

（4）圖示方法獲得的目的基因在受體菌中更容易表達，是因為cDNA中不含有內含子，轉錄出的RNA不需要經(jīng)過加工，可直接作為合成蛋白質的模板。