Question

【題目】肥胖已經(jīng)嚴重危害人類健康。3T3-L1前脂肪細胞是小鼠胚胎來源、具有纖維母細胞形態(tài)的細胞株，在胰島素（INS)、地塞米松（DEX)和3-異丁基-1-甲基-黃嗓呤（IBMX)的共同刺激下，具有100%分化成成熟脂肪細胞的能力，是目前國際上體外研究肥胖及脂代謝常用的細胞模型。為研究發(fā)酵大麥提取物對3T3-L1前脂肪細胞分化的影響，科研人員進行了相關(guān)實驗。將一定數(shù)目的植物乳桿菌接種到經(jīng)過處理的粉碎過篩大麥和水的混合液中，制備發(fā)酵大麥提取物（LFBE)。除不接種植物乳桿菌外，其余操作方法相同，制備未發(fā)酵大麥提取物（RBE)。實驗處理及結(jié)果如下。（表格中+表示加入了該物質(zhì)，-表示未加入）

組別 處理方法	模型組	空白組	對照組（提取物濃度ug/mL）			實驗組（提取物濃度ug/mL）
			100	200	400	100	200	400
3T3-L1前脂肪細胞+培養(yǎng)液	+	+	+	+	+	+	+	+
1 ；	+	-	-	-	-	-	-	-
2 ；	-	-	+	+	+	-	-	-
3 ；	-	-	-	-	-	+	+	+

（1）表格處理方法1、2、3的變量分別是__________、__________、_________。

（2）實驗結(jié)果：經(jīng)RBE處理3TL3-L1前脂肪細胞誘導(dǎo)分化后，與模型組相比，中低濃度的RBE均未顯著減少細胞分化率，400ug/mLRBE處理組細胞分化率為模型組的90%。與模型組細胞相比，經(jīng)LFBE處理3TL3-L1前脂肪細胞誘導(dǎo)分化后，低、中和高三個濃度的LFBE均能顯著減少細胞分化率。與RBE相比，LFBE明顯抑制3T3-L1前脂肪細胞分化且隨濃度增加，抑制能力加強，其中400ug/mLLFBE組細胞分化率只占模型組的40%，僅比空白組多14%。請用柱狀圖表示出所得實驗結(jié)果。

______

（3）要觀察3T3-L1前脂肪細胞分化成成熟脂肪細胞的程度，可用_________染色，典型的成熟脂肪細胞的形態(tài)表現(xiàn)為細胞進一步增大，呈圓形，胞內(nèi)布滿__________色脂滴，密集于核周，形成“指環(huán)樣”結(jié)構(gòu)。

（4）多種激素和生長因子在脂肪細胞分化過程中發(fā)揮著重要的作用。近些年的研究顯示，這些激素或生長因子在作用于脂肪細胞膜表面的________后，經(jīng)不同信號通路的信號傳遞，通過直接或間接的修飾調(diào)控脂肪細胞分化的轉(zhuǎn)錄因子活性，進而實現(xiàn)對脂肪細胞分化的調(diào)控。

Answer 1

【答案】 INS、DEX、IBMX RBE LFBE 蘇丹Ⅲ 橙黃色 特異性受體

【解析】本題考查實驗設(shè)計、脂肪的鑒定，激素作用特點相關(guān)知識，意在考察考生對知識點的理解、作圖和應(yīng)用能力。

（1）實驗中要遵循單一變量的原則，由題意可知3T3-L1前脂肪細胞在胰島素（INS)、地塞米松（DEX)和3-異丁基-1-甲基-黃嗓呤（IBMX)的共同刺激下，具有100%分化成成熟脂肪細胞的能力。而該實驗研究的是發(fā)酵大麥提取物對3T3-L1前脂肪細胞分化的影響所以實驗表格中處理方法1應(yīng)標準模型應(yīng)是INS、DEX、IBMX三者都有，2組應(yīng)是對照組即未發(fā)酵大麥提取物RBE，3應(yīng)是實驗組RBE。

（2）根據(jù)實驗結(jié)果作圖即可，以細胞分化率為縱坐標，以不同濃度的RBEH和LFBE為橫坐標，1組作為標準模型即分化率為100%為標準對照，因為400ug/mLLFBE組細胞分化率只占模型組的40%，通過計算空白對照組應(yīng)占40%-14%=26%；圖中要表示出400ug/mLLFBE組細胞分化率只占模型組的40%，因為隨著LFBE濃度增加，抑制能力加強，所以低濃度的LFBE細胞分裂率比該濃度的要高即可。

（3）脂肪可以用蘇丹Ⅲ進行染色，會出現(xiàn)橙黃色的現(xiàn)象。

（4）激素和生長因子需要與特異性受體結(jié)合后才能發(fā)揮作用，所以只有作用于脂肪細胞膜表面的特異性受體后才能發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。