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6.淀粉分解菌是能分解淀粉的一類微生物,在自然條件下,淀粉分解菌和其他各種細(xì)菌混雜生活在土壤中.某實(shí)驗(yàn)小組利用培養(yǎng)基將土壤中的淀粉分解菌篩選出來,回答下列問題:
(1)將土壤中的淀粉分解菌篩選出來的培養(yǎng)基應(yīng)添加淀粉作為唯一的碳源.若要配制為固體培養(yǎng)基,還要加入瓊脂作為凝固劑.
(2)在淀粉分解菌的培養(yǎng)操作過程中,為防止雜菌污染,需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌(消毒、滅菌);操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和消毒(消毒、滅菌).
(3)稀釋涂布平板法可用于微生物的接種和計(jì)數(shù),該實(shí)驗(yàn)小組將樣液分別稀釋了10倍、102 倍、103 倍、104 倍,然后將102 倍、103 倍、104倍的稀釋液分別涂布在不同的平板上.若有三個平板均涂布了稀釋倍數(shù)為103 倍的稀釋液1 mL,分別形成了 68、70和72個菌落,則樣液中每毫升含有淀粉分解菌7×104個,該方法測量值一般比實(shí)際值�。ǖ汀⑸伲�
(4)涂布一段時間后,待長出菌落后可向培養(yǎng)基中滴入碘液,菌落周圍出現(xiàn)透明圈的,就是目的菌株.
(5)根據(jù)以上實(shí)驗(yàn)分析,要減少平板菌落計(jì)數(shù)產(chǎn)生的誤差,可采取什么措施(答出一項(xiàng)即可)?
分析 1、培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成
①各種培養(yǎng)基的具體配方不同,但一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽;
②不同培養(yǎng)基還要滿足不同微生物對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求.
2、檢測土壤中細(xì)菌總數(shù),可以看出采用的計(jì)數(shù)方法是稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù).用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)時,在每一個梯度濃度內(nèi),至少要涂布3個平板,選擇菌落數(shù)在30~300的進(jìn)行記數(shù),求其平均值,再通過計(jì)算得出土壤中細(xì)菌總數(shù).
解答 解:(1)要將土壤中的淀粉分解菌篩選出來,培養(yǎng)基應(yīng)添加淀粉作為唯一的碳源.若要配制為固體培養(yǎng)基,還要加入瓊脂作為凝固劑.
(2)為防止雜菌污染,需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌;操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和消毒.
(3)涂布多個稀釋倍數(shù)的稀釋液的目的是稀釋平板法培養(yǎng)出微生物的單個菌落,達(dá)到純培養(yǎng)的目的.由題意知1ml原樣液中的菌落數(shù)是68+70+723×103=7×104個.稀釋涂布平板得到的菌落可能存在兩個或多個細(xì)菌細(xì)胞長成一個菌落,使該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果往往會比實(shí)際活菌數(shù)目要低.
(4)碘液可以鑒定淀粉產(chǎn)生藍(lán)色反應(yīng),涂布一段時間后,待長出菌落后可向培養(yǎng)基中滴入碘液,菌落周圍出現(xiàn)透明圈的,說明淀粉被分解,則該菌落就是目的菌株.
(5)要減少平板菌落計(jì)數(shù)產(chǎn)生的誤差,至少涂布3個平板,作為重復(fù)組(設(shè)置重復(fù)組);樣品的稀釋倍數(shù)要合適(選擇菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù));設(shè)置不接種的培養(yǎng)基作為空白對照,確認(rèn)培養(yǎng)基不受污染.
故答案為:
(1)淀粉 瓊脂
(2)滅菌 消毒
(3)7×104 �。ǖ汀⑸伲�
(4)透明圈
(5)至少涂布3個平板,作為重復(fù)組(設(shè)置重復(fù)組);樣品的稀釋倍數(shù)要合適(選擇菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù));設(shè)置不接種的培養(yǎng)基作為空白對照,確認(rèn)培養(yǎng)基不受污染
點(diǎn)評 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識,要求考生識記培養(yǎng)基的成分以及制備方法,識記無菌技術(shù)的主要內(nèi)容,掌握微生物分離與計(jì)數(shù)的方法等,同時要求考生具有一定的實(shí)驗(yàn)技能.
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(1)出現(xiàn)磚紅色沉淀的試管有 。
(2)試管A、B形成對照,說明酶具有 。試管A、C形成對照,說明高溫會破壞酶的 進(jìn)而使酶失去活性。
(3)在加入斐林試劑檢驗(yàn)之前,試管D中剩余的物質(zhì)有水、多肽、 。
(4)除了溫度和PH對酶活性有影響外,一些抑制劑也會降低酶的催化效果。圖1為酶作用機(jī)理及兩種抑制劑影響酶活性的機(jī)理示意圖,圖2為相同酶溶液在無抑制劑、添加不同抑制劑的條件下,酶促反應(yīng)速率隨底物濃度變化的曲線。

①據(jù)圖1分析可推測,競爭性抑制劑與 具有類似結(jié)構(gòu)因而能與酶的活性位點(diǎn)相結(jié)合。非競爭性抑制劑降低酶活性的機(jī)理與 (選填“高溫”、“低溫”、“強(qiáng)酸”)。對酶活性抑制的機(jī)理相同。
②圖2中代表在酶中添加了競爭性抑制劑、非競爭抑制劑的曲線分別是 、 。當(dāng)?shù)孜餄舛认鄬χ荡笥?5時,限制曲線甲酶促反慶速率的主要因素是 。
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