Question

（10分）為了提高乙肝疫苗的預(yù)防效果，科學(xué)家們對于該疫苗的研發(fā)過程做如下改進：提取乙肝病毒（HBV）基因重組后，與β-半乳糖苷酶基因結(jié)合，形成重組質(zhì)粒BPT（如圖1），隨后的操作如圖2，請回答下列問題：

（1）在圖一中_____（A/B）插入終止子。構(gòu)建重組質(zhì)粒BPT必須使用__________作為工具酶。

（2）從大腸桿菌中提取融合蛋白P-BPT仍需進一步修飾、純化。其主要原因是因為大腸桿菌不具備__________（細胞器）。

（3）實驗中抽取小鼠脾的淋巴細胞進行細胞培養(yǎng)，在培養(yǎng)基中需要添加_______防止雜菌生長。從分子水平上使用__________對特異性免疫應(yīng)答結(jié)果進行檢測。

Answer 1

(1)B 限制酶、DNA連接酶 (2)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體 (3)抗生素 抗原---抗體雜交

【解析】

試題分析：（1）構(gòu)建基因表達載體時，終止子應(yīng)位于目的基因的末端，即圖中的B處；構(gòu)建重組質(zhì)粒BPT必須使用限制酶、DNA連接酶作為工具酶。

（2）融合蛋白P-BPT屬于分泌蛋白，需要內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體的加工，但由于大腸桿菌細胞內(nèi)僅有核糖體一種細胞器，所以從大腸桿菌中提取 融合蛋白P-BPT仍需進一步修飾、純化。

（3）細菌對抗生素敏感，所以為了防止雜菌污染，需在培養(yǎng)基中添加抗生素；從分子水平上可使用抗原—抗體雜交對特異性免疫應(yīng)答結(jié)果進行檢測。

考點：本題考查基因工程的相關(guān)知識，意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡(luò)的能力。