Question

下圖是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線?圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因,ampR表示氨芐青霉素抗性基因,BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直線所示為三種限制酶的酶切位點?

據(jù)圖回答:

(1)圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體,需用____________________________

_________________________________限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因?篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含_________________________________的培養(yǎng)基上進行?

(2)能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細胞中特異性表達的調(diào)控序列是_　　　　　　　 ___　 ___________________(填字母代號)?

A.啟動子　　　　　　　 B.tetR

C.復制原點　　　　 D.ampR

(3)過程①可采用的操作方法是_________________________________(填字母代號)?

A.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化　　　　 B.大腸桿菌轉(zhuǎn)化

C.顯微注射　　　　 D.細胞融合

(4)過程②采用的生物技術(shù)是____________________________?

(5)對早期胚胎進行切割,經(jīng)過程②可獲得多個新個體?這利用了細胞的_　　　　　　　 ___　 _____________________性?

(6)為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達,可采用_________________________________(填字母代號)技術(shù)?

A.核酸分子雜交　　　　 B.基因序列分析

C.抗原—抗體雜交　　　　 D.PCR

 

Answer 1

(1)HindⅢ和BamHⅠ 氨芐青霉素 (2)A (3)C (4)胚胎移植技術(shù) (5)全能 (6)C

 

本題綜合考查基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識,同時考查利用所學原理解決實際問題的能力?(1)SamⅠ酶切位點在人乳鐵蛋白基因內(nèi),如用其酶切載體,則會破壞目的基因,故排除?為防止目的基因和載體自身連接,在利用限制酶進行切割時,兩端需要剪切不同的黏性末端,因此需要用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因?因人乳鐵蛋白基因插入位置位于四環(huán)素抗性基因內(nèi),因此該基因不能表達而導致受體細胞無四環(huán)素抗性;又因為載體上的氨芐青霉素抗性基因未被破壞,所以受體細胞具有氨芐青霉素抗性,故篩選含有重組載體的大腸桿菌需要在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進行?(2)啟動子位于基因的首端,可驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,使基因得以表達,故屬于調(diào)控序列?(3)過程①將目的基因?qū)�入到動物的受精卵�?一般采用顯微注射法?(4)過程②表示將早期胚胎移入代孕牛體內(nèi)繼續(xù)發(fā)育,故為胚胎移植技術(shù)?(5)早期胚胎分割成幾份后,每份經(jīng)移植和培養(yǎng)后都能形成一個新的個體,利用了細胞的全能性?(6)人乳鐵蛋白基因成功表達的標志是產(chǎn)生了人乳鐵蛋白,因此可利用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測其是否成功表達?