Question

【題目】三孢布拉氏霉菌具有β－胡蘿卜素含量高.易于培養(yǎng)等特點而廣泛用于工業(yè)化β－胡蘿卜素的生產(chǎn)。

下圖l是在發(fā)酵罐內(nèi)三孢布拉氏霉菌菌體生物量及β－胡蘿卜素產(chǎn)量隨時間變化曲線圖。圖2是樣品層析結(jié)果及與β一胡蘿卜素標準樣的比對。請回答下列問題：

（1）用稀釋涂布平板法篩選和純化三孢布拉氏霉菌，配制稀釋倍數(shù)為101~106的系列稀釋液時，需用移液管將1mL菌液移入盛有__mL蒸餾水的試管中。對同一濃度的稀釋液，分別用血球計數(shù)板計數(shù)和稀釋涂布平板法計數(shù)，若不存在實驗誤操作，則后者的數(shù)量少于前者，其原因是_______。若要所得估計值更接近實際值，除應(yīng)嚴格操作.多次重復(fù)外，還應(yīng)該保持待測樣品稀釋的________________。

（2）不同的材料選用的提取方法不同。用萃取法提取胡蘿卜素，但從橘皮中提取精油應(yīng)采用___法；為了提高出油率，壓榨前采用的方法是_________。

（3）圖2為萃取的胡蘿卜素樣品通過紙層析進行鑒定的結(jié)果。從圖中分析可知，色帶__為β－胡蘿卜素。出現(xiàn)樣品2的結(jié)果，可能原因有：①在萃取過程中__（A. 萃取溫度高，時間長／B. 干燥溫度高，時間長）；②在鑒定過程中__（A. 未經(jīng)濃縮蒸餾／B. 點樣太快，樣點小）。

Answer 1

【答案】 9 當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落 比例合適 壓榨 將橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡 Ⅰ B A

【解析】試題分析：圖1中，在發(fā)酵罐內(nèi)利用三孢布拉氏霉發(fā)酵生產(chǎn)β-胡蘿卜素過程中，β-胡蘿卜素產(chǎn)量應(yīng)該是三孢布拉氏霉處于穩(wěn)定期時進行連續(xù)培養(yǎng)時獲得的產(chǎn)量最高。圖2表示用紙層析法鑒定胡蘿卜素的實驗過程。

（1）進行梯度稀釋時，需要將1mL菌液移入盛有9ml的無菌水中。使用稀釋涂布平板法進行微生物計數(shù)時，當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，而導(dǎo)致結(jié)果可能會偏小。若要所得估計值更接近實際值，除應(yīng)嚴格操作.多次重復(fù)外，還應(yīng)該保持待測樣品稀釋的比例合適。

（2）橘皮精油的提取常用壓榨法，為了提高出油率，壓榨前需將橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡，浸泡時間為10h以上，這樣壓榨時不會滑脫。

（3）據(jù)圖分析，色素帶Ⅰ與標準樣色素帶一致，故其為β胡蘿卜素，出現(xiàn)樣品2胡蘿卜素含量減少的結(jié)果，可能原因是在操作過程中干燥溫度高，時間長或未經(jīng)濃縮蒸餾，導(dǎo)致色素被破壞。萃取溫度高，會導(dǎo)致雜質(zhì)增多；點樣太快會出現(xiàn)樣品1的現(xiàn)象。