Question

重組酵母乙肝疫苗是通過轉基因的方法將人乙肝表面抗原（HbsAg）的基因導入畢赤酵母中獲得的，具有原料易得、產(chǎn)量大、安全、高效等特點．如圖是重組酵母乙肝疫苗的生產(chǎn)過程．
（1）與大腸桿菌相比，畢赤酵母菌具有

 

等細胞器，用其作為基因工程的受體細胞，可以對合成的乙肝表面抗原進行

 

，并分泌到細胞外，便于提�。�
（2）圖中氨芐青霉素抗性基因作為

 

，作用是

 

．
（3）PCR技術利用

 

原理，該技術使用的工具酶是

 

．
（4）從資料3可以看出，不同種限制性內切酶切割DNA分子后產(chǎn)生的末端類型有

 

和

 

．試寫出AvrⅡ酶切割后產(chǎn)生的末端片段：

 

（5）為避免質粒和目的基因自身環(huán)化，在將HBsAg基因和pPIC9K質粒重組時，應該用限制酶

 

處理HBsAg基因兩側．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術

專題：

分析：分析圖表：構建基因表達載體時，使用限制酶SacⅠ切割會破壞啟動子，使用限制酶BglⅡ切割會導致重組質粒丟失啟動子和抗性基因，因此為避免質粒和目的基因自身環(huán)化，在將HBsAg基因和pPIC9K質粒重組時，應該用限制酶SnaBⅠ、AvrⅡ處理HBsAg基因兩側．

解答： 解：（1）大腸桿菌屬于原核生物，其細胞中只有核糖體一種細胞器，而畢赤酵母菌屬于真核生物，其細胞中具有內質網(wǎng)、高爾基體等細胞器，用其作為基因工程的受體細胞，可以對合成的乙肝表面抗原進行加工（修飾），并分泌到細胞外，便于提�。�
（2）圖中氨芐青霉素抗性基因作為標記基因，作用是鑒定受體細胞中是否含有人乙肝表面抗原（HbsAg）的基因，從而將含有人乙肝表面抗原（HbsAg）的基因的細胞篩選出來．
（3）PCR技術的原理是DNA復制；該技術是在較高溫度條件下進行的，因此需要使用熱穩(wěn)定DNA聚合酶．
（4）從資料3可以看出，不同種限制性內切酶切割DNA分子后產(chǎn)生的末端類型有平末端和黏性末端．AvrⅡ酶切割后產(chǎn)生的黏性末端，其產(chǎn)生的末端片段為：．
（5）由以上分析可知，為避免質粒和目的基因自身環(huán)化，在將HBsAg基因和pPIC9K質粒重組時，應該用限制酶SnaBⅠ、AvrⅡ處理HBsAg基因兩側．
故答案為：
（1）內質網(wǎng)、高爾基體    加工（修飾）
（2）標記基因    鑒定受體細胞中是否含有人乙肝表面抗原（HbsAg）的基因，從而將含有人乙肝表面抗原（HbsAg）的基因的細胞篩選出來
（3）DNA復制    熱穩(wěn)定DNA聚合酶
（4）平末端    黏性末端  
（5）SnaBⅠ、AvrⅡ

點評：本題結合圖表，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、適宜的工具及具體的操作步驟，能結合圖中和表中信息準確答題，屬于考綱理解和應用層次的考查．