Question

14．請(qǐng)回答下列有關(guān)生物技術(shù)實(shí)踐方面的問(wèn)題：
（1）微生物的培養(yǎng)和鑒別技術(shù)是一項(xiàng)基本技術(shù)．為了從樣本中獲取細(xì)菌的單菌落，可用平板劃線(xiàn)法及稀釋涂布法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得．培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí)，應(yīng)該采用的方法是髙壓蒸汽滅菌法．為統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目，在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)適當(dāng)時(shí)間后形成菌落，一般選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)．
（2）泡菜雖然好吃，但其中的亞硝酸鹽會(huì)危害人體健康．亞硝酸鹽在特定條件下會(huì)轉(zhuǎn)變成亞硝胺，這是一種致癌物，測(cè)定亞硝酸鹽含量的原理是在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與顯色劑反應(yīng)，生成玫瑰紅色物質(zhì)正常情況下，隨著腌制時(shí)間的延長(zhǎng)，亞硝酸鹽含量的變化趨勢(shì)是先增加后減少，然后基本不變．

Answer 1

分析 1、微生物常見(jiàn)的接種的方法
①平板劃線(xiàn)法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線(xiàn)，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線(xiàn)的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線(xiàn)的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．
2、泡菜的制作原理
泡菜的制作離不開(kāi)乳酸菌．在無(wú)氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸．
3、測(cè)定亞硝酸鹽含量的原理
在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料．將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行目測(cè)對(duì)比，可以大致估算出亞硝酸鹽的含量．

解答 解：（1）為了從樣本中獲取細(xì)菌的單菌落，可用平板劃線(xiàn)法及稀釋涂布法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得．培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí)，應(yīng)該采用的方法是髙壓蒸汽滅菌法．為統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目，在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)適當(dāng)時(shí)間后形成菌落，一般選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)．
（2）亞硝酸鹽在特定條件下會(huì)轉(zhuǎn)變成亞硝胺，這是一種致癌物，測(cè)定亞硝酸鹽含量的原理是在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與顯色劑反應(yīng)，生成玫瑰紅色物質(zhì)．發(fā)酵初期，由于硝酸鹽還原菌的活動(dòng)，亞硝酸鹽含量有所增加；發(fā)酵中期，由于硝酸鹽還原菌受抑制，同時(shí)形成的亞硝酸鹽又被分解，因而亞硝酸鹽含量下降．所以在整個(gè)發(fā)酵過(guò)程中，亞硝酸鹽含量的變化趨勢(shì)是先增加后減少，然后基本不變．
故答案為：
（1）平板劃線(xiàn)      稀釋涂布     固體培養(yǎng)基    髙壓蒸汽滅菌法     30-300
（2）亞硝胺    鹽酸酸化      先增加后減少，然后基本不變

點(diǎn)評(píng) 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)以及泡菜制作的有關(guān)知識(shí)，要求考查能夠掌握微生物分離與純化以及滅菌的方法，識(shí)記泡菜制作的原理以及制作過(guò)程中亞硝酸鹽含量的變化趨勢(shì)，難度適中．