Question

已知玉米因受到玉米螟危害而減產，玉米螟食用某種原核生物分泌的?-蛋白后死亡．因此，可將?-蛋白基因轉入到玉米體內，使玉米獲得抗玉米螟危害的能力．請據(jù)此回答下列問題：
（1）為了獲得?-蛋白的基因，在已知?-蛋白的氨基酸序列的基礎上，推測出?-蛋白的序列，據(jù)此可利用

 

方法合成目的基因．獲得?-蛋白的基因還可用

 

、

 

方法．
（2）如圖，若用限制酶E和F從原核生物基因組DNA上切下?-蛋白的基因，并將之取代質粒Z1上相應的E-F區(qū)域 （0.4kb，1kb=1000對堿基）．（圖中E、F、G、H是4種識別序列完全不同的限制酶及其部分識別位點）
①此時所形成的重組質粒Z2的大小為5.4kb，問目的基因的大小是

 

；
②若用限制酶E和F處理Z2，則會出現(xiàn)Z2

 

；
A．既能被E也能被F切開           B．能被E但不能被F切開
C．既不能被E也不能被F切開       D．能被F但不能被E切開
③若用限制酶G切割Z1，可得到一種2.5kb的DNA片段；若用限制酶G切割Z2，可得到2.5kb、1.4kb和0.1kb三種片段，問Z2上有

 

個限制酶G識別位點．
（3）若用含有重組質粒的土壤農桿菌直接感染玉米植株的根部傷口，則該植株的種子中

 

（填“含有”或“不含”）?-蛋白基因．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術

專題：

分析：1、獲得目的基因的方法：①從基因文庫中獲�、诶�用PCR技術擴增③人工合成（化學合成）．原核基因采取直接分離獲得，真核基因是人工合成．
2、農桿菌特點：易感染雙子葉植物和裸子植物，對單子葉植物沒有感染力；Ti質粒的T-DNA可轉移至受體細胞，并整合到受體細胞的染色體上．

解答： 解：（1）目的基因較小，而且核苷酸序列已知的情況，可以用人工合成法合成目的基因．還可以通過基因文庫中直接獲取、PCR技術擴增目的基因．
（2）①根據(jù)圖示．Z2由Z1中的EF段被目的基因替換而成的．假設目的基因的大小為Xkb，根據(jù)圖示可知：3.2+0.8+0.6+x=5.4，可得x=0.8kb．
②構建重組質粒時用同種限制酶切割目的基因和質粒，使它們具有相同的末端，再用DNA連接酶鏈接形成重組質粒．由Z2的形成過程圖，可知，?-蛋白的基因是用限制酶E和F從原核生物基因組DNA上切下，并取代質粒Z1上相應的E-F區(qū)域．如果用限制酶E和F處理Z2，可能E、F兩處位點再次被切開．
③已知重組質粒Z2的大小為5.4kb，若用限制酶G切割Z2，可得到2.5kb、1.4kb和0.1kb三種片段，可推知共產生四各片段分別為：一段為2.5kb、兩段為1.4kb和一段為0.1kb，因此限制酶G將環(huán)狀的Z2切割四個位點，獲得如上的三種片段．
（3）農桿菌易感染雙子葉植物和裸子植物，對單子葉植物沒有感染力．
故答案為：
（1）人工合成　基因文庫　   PCR
（2）①0.8kb   ②A      ③4     
（3）不含

點評：本題著重考查了基因工程相關方面的知識，意在考查考生能識記并理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯(lián)系，形成一定知識網絡的能力，并且具有一定的分析能力和理解能力．