Question

【題目】大腸桿菌是人和動(dòng)物腸道中普遍存在的一種兼性厭氧菌，在無(wú)氧條件下，大腸桿菌通過發(fā)酵能將葡萄糖轉(zhuǎn)變?yōu)槎喾N有機(jī)酸并產(chǎn)生CO2等氣體。某研究機(jī)構(gòu)使用“濾膜法”對(duì)受污染的河流水體進(jìn)行了大腸桿菌活菌數(shù)目的測(cè)定。請(qǐng)回答下列問題：

(1)為了鑒別大腸桿菌菌落，可向培養(yǎng)基中加入________________________作為指示劑。

(2)測(cè)定大腸桿菌活菌數(shù)目時(shí)，需制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中為細(xì)菌提供氮源的物質(zhì)是__________________。

(3)為了便于統(tǒng)計(jì)污染嚴(yán)重的水體中活菌的數(shù)目，需將水樣進(jìn)行適當(dāng)稀釋，例如取水樣1 mL加入無(wú)菌水________________ mL制備稀釋倍數(shù)為102的稀釋液，并照此依次制備更高倍數(shù)的稀釋液。每個(gè)稀釋倍數(shù)的菌液取10 mL進(jìn)行過濾，然后將濾膜放置在培養(yǎng)基上。為了防止雜菌污染，稀釋、過濾和旋轉(zhuǎn)濾膜等操作都應(yīng)該在________附近進(jìn)行。

(4)將放有濾膜的平板置于適宜條件下培養(yǎng)，每隔12 h統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，應(yīng)選取菌落數(shù)目________時(shí)的記錄作為結(jié)果。如果經(jīng)過培養(yǎng)后稀釋倍數(shù)為102的4個(gè)平板上菌落數(shù)分別為43、47、42、48，那么每升河水中約含大腸桿菌________個(gè)。用這種方法測(cè)定的細(xì)菌數(shù)量比實(shí)際活菌數(shù)量要少，這是因?yàn)?/span>________________________________________________________________________。

Answer 1

【答案】 伊紅－美藍(lán) 牛肉膏和蛋白胨 99 酒精燈火焰 穩(wěn)定 4.5×106 當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的是一個(gè)菌落

【解析】試題分析：水中大腸桿菌的檢測(cè)可以用濾膜法進(jìn)行，可以用伊紅美蘭培養(yǎng)基進(jìn)行鑒別；活菌計(jì)數(shù)法應(yīng)取幾個(gè)平板上菌落的平均數(shù)來計(jì)算，計(jì)算方法為菌落數(shù)÷菌液體積×稀釋倍數(shù)。

(1)為了鑒別大腸桿菌菌落，可向培養(yǎng)基中加入伊紅和美藍(lán)作為指示劑，觀察是否出現(xiàn)深紫色并伴有金屬光澤的菌落。

(2)牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基中為細(xì)菌提供氮源的物質(zhì)是牛肉膏和蛋白胨。

(3)對(duì)水樣進(jìn)行稀釋時(shí)，取水樣1 mL加入無(wú)菌水99 mL可制備稀釋倍數(shù)為102的稀釋液。為了防止雜菌污染，稀釋、過濾和旋轉(zhuǎn)濾膜等操作都應(yīng)該在酒精燈火焰附近的無(wú)菌區(qū)進(jìn)行。

(4)將放有濾膜的平板置于適宜條件下培養(yǎng)，每隔12 h統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，應(yīng)選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果。經(jīng)過培養(yǎng)后稀釋倍數(shù)為102的4個(gè)平板上菌落數(shù)平均為(43＋47＋42＋48)÷4＝45(個(gè))，那么每升河水中約含大腸桿菌45×102×1 000＝4.5×106(個(gè))。由于當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的是一個(gè)菌落，所以用這種方法測(cè)定的細(xì)菌數(shù)量比實(shí)際活菌數(shù)量要少。