Question

5．微生物培養(yǎng)與分離技術是生物學中重要的實驗技術．根據(jù)有關微生物的知識，分析回答問題：

（1）培養(yǎng)基的制備需經(jīng)過計算、稱量、溶化和A：滅菌、B：倒平板等過程，上述過程中需要在超凈工作臺上操作的是倒平板．
（2）純化菌種時為得到單菌落，常采用的接種方法是平板劃線法和D：稀釋涂布平板法，其中需用接種環(huán)進行操作的是平板劃線法．
（3）為達到篩選土壤中分解尿素細菌的目的，平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基應以尿素作為唯一的氮源，培養(yǎng)基中加入指示劑酚紅培養(yǎng)后，若變紅以鑒定其中含有所需細菌．若篩選纖維素分解菌，在選擇培養(yǎng)后須進行E：梯度稀釋和F：涂布平板過程，一般通過觀察透明圈的有無挑選出所需菌種．

Answer 1

分析 制備培養(yǎng)基的步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板．微生物接種的核心是防止雜菌的污染，保證培養(yǎng)物的純度．
純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法．前者是指通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種，逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面；后者是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)．
從土壤中分離尿素分解菌的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株．尿素分解菌產(chǎn)生的脲酶能夠將以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中的尿素分解為氨，使pH升高，培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑后呈紅色．

解答 解：（1）培養(yǎng)基的制備需經(jīng)過計算、稱量、溶化和滅菌、倒平板等過程，上述過程中需要在超凈工作臺上操作的是倒平板，防止雜菌的污染．
（2）純化菌種時為得到單菌落，常采用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中需用接種環(huán)進行操作的是平板劃線法，即通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種，逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面．
（3）為達到篩選土壤中分解尿素細菌的目的，平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基應以尿素作為唯一的氮源，培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)，由于尿素分解菌能將尿素分解為氨，使pH升高．因此，若出現(xiàn)變紅現(xiàn)象，說明其中含有所需細菌．若篩選纖維素分解菌，在選擇培養(yǎng)后須進行梯度稀釋和涂布平板過程，一般通過觀察透明圈的有無挑選出所需菌種．
故答案為：
（1）滅菌  倒平板  倒平板 
（2）稀釋涂布平板    平板劃線法
（3）氮源   酚紅  梯度稀釋  涂布平板   透明圈

點評 本題考查微生物培養(yǎng)與分離技術的相關知識，意在考查學生的識記能力和判斷能力，運用所學知識綜合分析問題的能力．