Question

（15分）生物興趣小組試圖探究牛和山羊的瘤胃中的微生物對尿素是否有分解作用，設(shè)計了以下實(shí)驗(yàn)，并成功篩選到能降解尿素的細(xì)菌（目的菌）。培養(yǎng)基成分如表所示，實(shí)驗(yàn)步驟如圖所示。請分析回答問題：

KH2PO4	1.4g
Na2HPO4	2.1g
MgSO4·7H2O	0.2g
葡萄糖	10g
尿素	1g
瓊脂	15g
溶解后自來水定容到1000mL

（1）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是 ，原理是 。從同化作用類型來看的，該菌屬于 。

（2）實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，原因是 。轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時，常采用 的方法接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選。

（3）在實(shí)驗(yàn)過程中：①培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿；②玻棒、試管、錐形瓶、吸管；③瘤胃中液體。其中需要滅菌是 （填序號）。

（4）分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時，甲同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個菌落。甲同學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果差異的原因可能有 （填序號）①取樣不同 ②培養(yǎng)基污染 ③操作失誤 ④沒有設(shè)置對照

（5）以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基培養(yǎng)“目的菌”后，加入 指示劑后變紅色，說明“目的菌”能分解尿素。理由是 。

（6）為進(jìn)一步確定取自瘤胃中液體的適當(dāng)稀釋倍數(shù)，將接種的培養(yǎng)皿放置在37°C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h～48h，觀察并統(tǒng)計具有紅色環(huán)帶的菌落數(shù)，結(jié)果如下表，其中 倍的稀釋比較合適。

稀釋倍數(shù)	103	104	105	106	107
菌落數(shù)	>500	367	248	36	18

Answer 1

（15分，除注明外，每空1分）

（1）篩選目的菌 只有能合成脲酶的細(xì)菌才能分解尿素，在該培養(yǎng)基上生長（2分） 異養(yǎng)型

（2）為目的菌提供氧氣 涂布平板法 （3）①和②（2分） （4）①②③（2分）

（5）酚紅指示劑 細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，PH增高，使酚紅指示劑變紅（2分）

（6）106或105（2分）

【解析】

試題分析：（1）加入尿素的目的是篩選能高效降解尿素的目的菌，其原理是：只有能合成脲酶的細(xì)菌才能分解尿素，在以尿素為氮源的培養(yǎng)基上生長。培養(yǎng)基中的碳源為葡萄糖，所以，該菌的同化作用類型為異養(yǎng)型。

（2）振蕩培養(yǎng)的目的是為目的菌提供氧氣。轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時，欲獲得單菌落，依圖示信息可以推出，常采用的接種方法是涂布平板法。

（3）在實(shí)驗(yàn)過程中，為了防止雜菌污染，需要對培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、玻棒、試管、錐形瓶、吸管等進(jìn)行滅菌，即需要對①和②滅菌。

（4）在實(shí)驗(yàn)時，如果取樣不同、培養(yǎng)基污染、操作失誤即①②③等都會導(dǎo)致分離篩選的菌落數(shù)多。

（5）“目的菌”合成的脲酶將培養(yǎng)基中的尿素分解成氨，氨可使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，使酚紅指示劑變紅。

（6）表中數(shù)據(jù)顯示，稀釋倍數(shù)為106和105時，得到的菌落數(shù)分別是36個和248個，因此106或105倍的稀釋比較合適。

考點(diǎn)：本題考查微生物的培養(yǎng)和分離的相關(guān)知識，意在考查學(xué)生能理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。