Question

【題目】科研人員從耐鹽植物中獲得了耐鹽基因，利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將耐鹽基因轉(zhuǎn)入水稻細(xì)胞中，進(jìn)而培育出了耐鹽水稻新品系。下圖表示構(gòu)建耐鹽基因表達(dá)載體的過(guò)程。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1)據(jù)圖分析可知，在構(gòu)建的耐鹽基因表達(dá)載體中，圖中未標(biāo)注出的必需元件有耐鹽基因啟動(dòng)子，其功能是_________________________________。

(2)據(jù)圖分析可知，在構(gòu)建耐鹽基因表達(dá)載體時(shí)，需要用______________對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行切割，從而保證______________________________。

(3)常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將耐鹽基因?qū)�入水稻受體細(xì)胞，根據(jù)農(nóng)桿菌的感染特點(diǎn)，將耐鹽基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上，經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)化作用進(jìn)入水稻細(xì)胞，并將其插入水稻細(xì)胞______________上，從而使其遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)。

(4)受體細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)后形成愈傷組織的過(guò)程稱(chēng)為______________，進(jìn)一步培育成幼苗，這體現(xiàn)了___________________________。檢測(cè)轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功可使用的最簡(jiǎn)便的方法是________________________________。

Answer 1

【答案】作為RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄 HindIII、XbaI 耐鹽基因與質(zhì)粒正確連接 染色體的DNA 脫分化 植物細(xì)胞的全能性 將其種植在鹽堿地上

【解析】

據(jù)圖分析，圖示為構(gòu)建基因表達(dá)載體的過(guò)程，目的基因是耐鹽基因，插入質(zhì)粒的位點(diǎn)1與位點(diǎn)2之間；目的基因兩側(cè)含有兩種不同的限制酶HindⅢ和XbaⅠ；質(zhì)粒上的氨芐青霉素抗性基因?yàn)闃?biāo)記基因。

（1）基因表達(dá)載體的基本組成成分包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等，其中啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和的結(jié)合位點(diǎn)，啟動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄。

（2）根據(jù)以上分析已知，目的基因兩側(cè)含有兩種不同的限制酶HindⅢ和XbaⅠ，因此應(yīng)該用這兩種酶對(duì)目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割，從而保證耐鹽基因與質(zhì)粒正確連接。

（3）在利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入水稻�?xì)胞（植物細(xì)胞）時(shí)，應(yīng)該將耐鹽基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上，經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)化作用進(jìn)入水稻細(xì)胞，并將其插入水稻細(xì)胞染色體的DNA上。

（4）受體細(xì)胞通過(guò)脫分化形成愈傷組織，最終培育成幼苗，該過(guò)程為植物組織培養(yǎng)過(guò)程，原理是植物細(xì)胞的全能性；檢測(cè)轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功，最簡(jiǎn)單的方法是將其種植在鹽堿地上，觀(guān)察其生長(zhǎng)情況。