Question

6．牛的食物主要是草莖類，其中含有大量的纖維素．牛胃內的微生物，在幫助消化和利用植物纖維素方面起了決定性的作用．回答下列問題：
（1）纖維素是地球上含量最豐富的多糖類物質，組成纖維素的單體為葡萄糖．牛胃中某些微生物能夠產(chǎn)生纖維素酶，這種酶是一種復合酶，其中的C₁酶、C_X酶能使纖維素分解成纖維二糖．    
（2）實驗室培養(yǎng)牛胃內的微生物，分離得到高純度纖維素分解菌的關鍵環(huán)節(jié)是防止外來雜菌的入侵．為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應在酒精燈火焰附近進行；倒平板用的培養(yǎng)皿需要保持干燥，可以采用干熱滅菌法進行滅菌．
（3）為了從牛胃的食麋中分離出纖維素分解菌，配制的選擇培養(yǎng)基要以纖維素作為唯一碳源．篩選纖維素分解菌時，常用的剛果紅染色法有兩種，一種是先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進行顏色反應，另一種是在到平板時就加入剛果紅．在涂布乎板時滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多，原因是培養(yǎng)基表面的菌懸液過多會導致菌體堆積，影響分離效果．

Answer 1

分析 1、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落．
2、消毒和滅菌

	消毒	滅菌
概念	使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用強烈的理化因素殺死物體內外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法、紫外線消毒法	灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌
適用對象	操作空間、某些液體、雙手等	接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等

3、分解纖維素的微生物的分離實驗的原理：
①土壤中存在著大量纖維素分解酶，包括真菌、細菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶．纖維素酶是一種復合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物則不能生長．
②在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物，當纖維素被分解后，紅色復合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌．

解答 解：（1）纖維素是一種多糖，其基本組成單位是葡萄糖；纖維素酶是一種復合酶，其中的C₁酶、C_X酶能使纖維素分解成纖維二糖．    
（2）微生物分離和培養(yǎng)的關鍵環(huán)節(jié)是防止外來雜菌的入侵；為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應在酒精燈火焰附近進行；倒平板用的培養(yǎng)皿需要保持干燥，可以采用干熱滅菌法進行滅菌．
（3）為了分離出纖維素分解菌，配制的選擇培養(yǎng)基要以纖維素作為唯一碳源．篩選纖維素分解菌時，常用的剛果紅染色法有兩種，一種是先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進行顏色反應，另一種是在到平板時就加入剛果紅．在涂布乎板時滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多，原因是培養(yǎng)基表面的菌懸液過多會導致菌體堆積，影響分離效果．
故答案為：
（1）葡萄糖    C₁酶、C_X酶
（2）防止外來雜菌的入侵     酒精燈火焰    干熱滅菌
（3）纖維素     在到平板時就加入剛果紅     培養(yǎng)基表面的菌懸液過多會導致菌體堆積，影響分離效果

點評 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記接種微生物常用的兩種方法，掌握無菌技術；識記分解纖維素的微生物的分離實驗的原理，能結合所學的知識準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．