1.為增加油菜種子的含油量,研究人員嘗試將酶D基因與位于葉綠體膜上的轉(zhuǎn)運肽基因相連,導入油菜細胞并獲得了轉(zhuǎn)基因油菜品種.
(1)研究人員依據(jù)基因的已知序列設計引物,采用PCR法從陸地棉基因文庫中獲取酶D基因,從擬南芥基因文庫中獲取轉(zhuǎn)運肽基因.在上述引物設計時,分別在引物中加入下圖所示酶的識別序列,這樣可以用ClaⅠ(限制酶)和DNA連接酶處理兩個基因后,得到A、D端(填圖中字母)相連的融合基因.

(2)將上述融合基因插入如圖2所示Ti質(zhì)粒的T-DNA中,構建表達載體(或“重組質(zhì)粒”)并導入農(nóng)桿菌中.將獲得的農(nóng)桿菌接種在含四環(huán)素的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落,再利用液體培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng),可以得到用于轉(zhuǎn)化的浸染液.
(3)剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時間,此過程的目的是利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思毎,進一步篩選后獲得轉(zhuǎn)基因油菜.
(4)提取上述轉(zhuǎn)基因油菜的mRNA,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下獲得cDNA,再依據(jù)融合基因的DNA片段設計引物進行擴增,對擴增結果進行檢測,可判斷融合基因是否完成轉(zhuǎn)錄.

分析 基因文庫包括cDNA文庫、基因組文庫等.某個群體包含一種生物所有的基因的文庫叫基因組文庫,而用某種生物發(fā)育的某個時期的mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的多種互補DNA片段屬于cDNA文庫.

解答 解:(1)研究人員依據(jù)基因的已知序列設計引物,采用PCR法從陸地棉基因文庫中獲取酶D基因,從擬南芥基因文庫中獲取轉(zhuǎn)運肽基因.在上述引物設計時,分別在引物中加入如圖甲所示酶的識別序列,這樣可以用ClaⅠ限制酶和DNA連接酶處理兩個基因后,得到A、D端相連的融合基因.
(2)將上述融合基因插入圖乙所示Ti質(zhì)粒的T-DNA中,構建表達載體即重組質(zhì)粒并導入農(nóng)桿菌中.將獲得的農(nóng)桿菌接種在含四環(huán)素的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落,再利用液體培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng),可以得到用于轉(zhuǎn)化的浸染液.
(3)剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時間,此過程的目的是利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思毎,進一步篩選后獲得轉(zhuǎn)基因油菜細胞.該細胞通過植物組織培養(yǎng)技術,可培育成轉(zhuǎn)基因油菜植株.
(4)提取上述轉(zhuǎn)基因油菜的mRNA,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下獲得cDNA,再依據(jù)融合基因的DNA片段設計引物進行擴增,對擴增結果進行檢測,可判斷融合基因是否完成轉(zhuǎn)錄.
故答案為:
(1)PCR    ClaⅠ(限制酶)和DNA連接   A、D
(2)表達載體(或“重組質(zhì)粒”)    四環(huán)素      液體
(3)利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思毎?br />(4)逆轉(zhuǎn)錄    融合基因     轉(zhuǎn)錄

點評 本題以增加油菜種子的含油量為材料背景,考查基因工程的相關知識,意在考查學生的識圖能力和判斷能力,運用所學知識綜合分析問題和解決問題的能力.

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B.①假說-演繹法 ②類比推理     ③類比推理
C.①假說-演繹法 ②類比推理     ③假說-演繹法
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