Question

2012年諾貝爾醫(yī)學(xué)和生理學(xué)獎授予英國科學(xué)家約翰?戈登和日本科學(xué)家山中伸彌．約翰?戈登在20世紀60年代做過一個劃時代的實驗：把美洲爪蟾的小腸上皮細胞核注入去核的卵細胞，結(jié)果發(fā)現(xiàn)一部分卵依然可以發(fā)育成蝌蚪，其中的一部分蝌蚪可以繼續(xù)發(fā)育成為成熟的爪蟾．山中伸彌等科學(xué)家將四個關(guān)鍵基因轉(zhuǎn)入小鼠的成纖維細胞，使其變成多功能干細胞（iPS），這些干細胞可再轉(zhuǎn)化成老鼠體內(nèi)任何種類的細胞．回答下列問題
（1）動物體細胞核移植的難度明顯高于胚胎細胞核移植，其原因是

 

．
（2）從卵巢中吸取的卵母細胞，一般要培養(yǎng)到

 

階段才能用于實驗，實驗中要用微型吸管吸出

 

與卵母細胞的

 

；從供體動物取出體細胞后，通過

 

技術(shù)將供體細胞注入去核卵母細胞，通過病毒介導(dǎo)或者

 

（物理）等方式使兩個細胞融合，供體細胞進入受體卵母細胞內(nèi)構(gòu)建重組胚胎．當胚胎發(fā)育到

 

階段時，將胚胎移入受體（代孕）動物體內(nèi)．
（3）在山中伸彌的實驗中，利用了逆轉(zhuǎn)錄病毒，該病毒的作用是

 

．
（4）一般情況下，體外擴增目的基因常用的方法是

 

．在動物細胞培養(yǎng)過程中，當貼壁細胞分裂生長到細胞表面相互接觸時，細胞會停止分裂增值，這種現(xiàn)象稱為細胞的

 

．要使貼壁的細胞從瓶壁上分離下來，需要用

 

處理．

Answer 1

考點：動物細胞核移植技術(shù),基因工程的原理及技術(shù),胚胎移植

專題：

分析：基因工程中載體有質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒．
動物細胞培養(yǎng)的過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞，制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)．
動物核移植是指將動物的一個細胞的細胞核移入一個去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎．在體外將采集到的卵母細胞培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才成熟，可以通過顯微操作技術(shù)去除卵母細胞的細胞核和第一極體，核移植時，對提供細胞核和細胞質(zhì)的奶牛不需要進行同期發(fā)情處理，使用電脈沖等方法可以激活重組細胞使其完成細胞分裂和發(fā)育．

解答： 解：（1）胚胎細胞核移植容易成功的原因是胚胎細胞分化程度低，全能性較高．
（2）從卵巢中吸取的卵母細胞，一般要培養(yǎng)到 MⅡ時期才能用于實驗，用微型吸管吸出 第一極體與卵母細胞的 細胞核；通過顯微注射技術(shù)將供體細胞注入去核卵母細胞，通過病毒介導(dǎo)或者 電脈沖（或電刺激）等方式使兩個細胞融合．胚胎發(fā)育到 桑椹胚或囊胚階段時可進行胚胎移植．
（3）基因工程中，病毒可用作目的基因的載體．
（4）體外擴增基因的方法是PCR技術(shù)，在動物細胞培養(yǎng)過程中，當貼壁細胞分裂生長到細胞表面相互接觸時，細胞會停止分裂增值，這種現(xiàn)象稱為細胞的 接觸抑制．要使貼壁的細胞從瓶壁上分離下來，需要用 胰蛋白酶處理．
故答案為：
（1）胚胎細胞分化程度低，全能性較高
（2）MⅡ中期（減數(shù)分裂第二次分裂中期）   第一極體   細胞核   顯微注射     電脈沖（或電刺激）   桑椹胚或囊胚
（3）目的基因的載體
（4）PCR技術(shù)（多聚酶鏈式反應(yīng)）  接觸抑制    胰蛋白酶

點評：本題考查動物細胞工程，要求學(xué)生識記動物細胞培養(yǎng)的具體過程，理解核移植操作過程，能把握知識間的聯(lián)系形成知識網(wǎng)絡(luò)．