Question

8．研究表明，HER2/neu是一種原癌基因，它表達的H蛋白在多種惡性腫瘤特別是乳腺癌細胞中過量表達．抗H蛋白單克隆抗體能抑制過量表達H蛋白的乳腺癌細胞的生長，目前已成為有效的生物治療手段．
（1）選擇H蛋白作為單克隆抗體的作用靶點，是因為H蛋白在成年個體的正常組織中低表達（填“低表達”或“高表達”）．H蛋白是一個跨膜蛋白，結構如圖所示．制備免疫小鼠用的H蛋白（抗原）時，應構建胞外區(qū)基因，轉入原核細胞表達并提純．
（2）將H蛋白注射到小鼠體內，從該小鼠的脾臟獲取B淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行融合，使用的不同于植物體細胞雜交的誘導方法是滅活的病毒．
（3）將融合細胞在選擇性培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時間后培養(yǎng)基中只有雜交瘤細胞生長．將雜交瘤細胞轉到多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，進行抗體陽性檢測．經多次篩選，就能得到產生單克隆抗體的雜交瘤細胞，該細胞的特點是既能在體外大量增殖，又能產生抗H蛋白的抗體．
（4）將篩選得到的雜交瘤細胞，經過體外（培養(yǎng)）或小鼠腹腔內培養(yǎng)，獲取大量的單克隆抗體．
（5）治療乳腺癌時，可單獨使用抗H蛋白單克隆抗體，也可將該單克隆抗體與抗癌藥物結合構建“生物導彈”，殺死癌細胞．這充分體現了單克隆抗體特異性強（或“識別抗原部位專一”）的特點．

Answer 1

分析 1、單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原，從該動物的脾臟中獲取效應B細胞，將效應B細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產生單一抗體的雜交瘤細胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細胞（體內培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體．
2、誘導動物細胞融合的方法有：物理法（離心、振動）、化學法（聚乙二醇）、生物法（滅活的病毒）．
3、雜交瘤細胞具有既能夠增殖又能產生抗體．

解答 解：（1）根據題意可知，H蛋白在多種惡性腫瘤特別是乳腺癌細胞中過量表達，因此原癌基因的表達產物H蛋白在正常組織中低表達；由于抗體主要存在于細胞外液中，因此根據H蛋白的結構圖可知，若用H蛋白制備抗原需要利用胞外區(qū)基因，由制備獲得的抗體作用于該抗原的胞外區(qū)．
（2）將H蛋白注射到小鼠體內，從該小鼠的脾臟中獲取B淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行融合；誘導植物原生質體融合的方法有物理法（離心、振動、電激等）、化學法（聚乙二醇），誘導動物細胞融合的方法有物理法、化學法和生物法（滅活的病毒），因此使用的不同于植物體細胞雜交的誘導方法是用滅活的病毒誘導．
（3）將融合細胞接種在選擇培養(yǎng)基中，從中選出雜交瘤細胞；再采用抗體陽性檢測法篩選出雜交瘤細胞，該細胞的特點是既能在體外大量增殖，又能產生抗H蛋白的抗體．
（4）將雜交瘤細胞經過體外培養(yǎng)或小鼠腹腔內培養(yǎng)，獲得大量的單克隆抗體．
（5）單克隆抗體的優(yōu)點是特異性強，靈敏度高．
故答案為：
（1）低表達　胞外       
（2）脾臟　滅活的病毒
（3）選擇性　既能在體外大量增殖，又能產生抗H蛋白的抗體   
（4）體外（培養(yǎng)）
（5）特異性強（或“識別抗原部位專一”）

點評 本題結合抑制癌癥的材料考查了單克隆抗體的相關知識，要求考生能夠從題干和題圖中獲取有效解題信息；識記單克隆抗體的制備過程以及細胞融合的誘導技術，識記單克隆抗體的優(yōu)點等方面的知識．