Question

13．豆?jié){是深受中國(guó)百姓喜愛(ài)的飲品，但易變質(zhì)，保質(zhì)期較短．科研人員對(duì)變質(zhì)豆?jié){中的腐敗細(xì)菌進(jìn)行分離，并研究了乳酸鏈球菌素對(duì)腐敗細(xì)菌的抑制效果，為生產(chǎn)豆?jié){時(shí)，優(yōu)化保質(zhì)方法提供依據(jù)．主要研究過(guò)程如下：
①豆?jié){變質(zhì)處理將2種市售豆?jié){A、B和自制豆?jié){在無(wú)菌操作臺(tái)上分別裝入已滅菌的250mL三角瓶中，密封、37℃條件下，放置7d后，豆?jié){發(fā)生變質(zhì)．
②腐敗細(xì)菌的初步分離和計(jì)數(shù)取變質(zhì)的豆?jié){在無(wú)菌條件下接種到細(xì)菌培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時(shí)間后．統(tǒng)計(jì)各培養(yǎng)基上菌落種類和數(shù)量．結(jié)果如表：

細(xì)菌 序號(hào)	菌落特征	菌落直徑/mm	菌落數(shù)/個(gè)
			豆?jié){A	豆?jié){B	自制豆?jié){
S1	表面有白色絨毛，圓形邊緣不規(guī)則	5	5	3	7
S2	白色，表面無(wú)絨毛，有白色液滴	1～2	18	11	24
S3	黃色，表面無(wú)絨毛，如同黃色液斑	20-30	11	7	15

③比較乳酸鏈球菌素添加量對(duì)腐敗細(xì)菌的抑制效果以自制的新鮮豆?jié){為材料，經(jīng)相應(yīng)處理后，在37℃下放置35d后，統(tǒng)計(jì)豆?jié){中腐敗細(xì)菌數(shù)量，結(jié)果如圖．
請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）步驟①中三角瓶的常用滅菌方法是干熱滅菌，步驟②中培養(yǎng)基的常用滅菌方法是高壓蒸汽滅菌．
 （2）步驟②中適宜采用的接種方法是稀釋涂布平板法．區(qū)分菌落種類的依據(jù)是菌落的形態(tài)、大小、隆起程度和顏色等特征．統(tǒng)計(jì)菌落種類和數(shù)量時(shí)要每隔24h觀察統(tǒng)計(jì)一次，直到各類菌落數(shù)目穩(wěn)定，以防因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的種類和數(shù)目．
（3）乳酸鏈球菌素是一種天然食品防腐劑，它是由34個(gè)氨基酸組成的多肽．步驟③結(jié)果表明，最能耐受乳酸鏈球菌素的細(xì)菌是S₁為有效防止豆?jié){腐敗，在生產(chǎn)中乳酸鏈球菌素的添加量應(yīng)控制在250mg．kg^-1左右．
（4）與用抗生素防腐相比，使用乳酸鏈球菌素防腐的優(yōu)點(diǎn)是食用后會(huì)被人體消化，不會(huì)改變?nèi)梭w腸道內(nèi)正常菌群．

Answer 1

分析 1、實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法
①灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速?gòu)氐椎販缇��?br />②干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌；
③高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，為達(dá)到良好的滅菌效果，一般在壓力為100 kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30 min．
2、分析曲線圖：圖中看出，隨著乳酸鏈球菌素的濃度的升高，S1細(xì)菌的數(shù)量相對(duì)值最高，S2其次；乳酸鏈球菌素濃度為250mg．kg^-1后，細(xì)菌的相對(duì)數(shù)量不再降低．

解答 解：（1）玻璃器皿一般采用干熱滅菌，培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌．
 （2）步驟②需要對(duì)“腐敗細(xì)菌的初步分離和計(jì)數(shù)”，因此適宜采用稀釋涂布平板法．區(qū)分菌落種類的依據(jù)是菌落的形態(tài)、大小、隆起程度和顏色等特征．統(tǒng)計(jì)菌落種類和數(shù)量時(shí)要每隔24h觀察統(tǒng)計(jì)一次，直到各類菌落數(shù)目穩(wěn)定，以防因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的種類和數(shù)目．
（3）分析曲線圖可知，隨著乳酸鏈球菌素的濃度的升高，S1細(xì)菌的數(shù)量相對(duì)值最高，即表明最能耐受乳酸鏈球菌素的細(xì)菌是S₁．曲線圖中看出，乳酸鏈球菌素濃度為250mg．kg^-1后，細(xì)菌的相對(duì)數(shù)量不再降低，即為有效防止豆?jié){腐敗，在生產(chǎn)中乳酸鏈球菌素的添加量應(yīng)控制在250mg．kg^-1左右．
（4）與用抗生素防腐相比，使用乳酸鏈球菌素防腐的優(yōu)點(diǎn)是食用后會(huì)被人體消化，不會(huì)改變?nèi)梭w腸道內(nèi)正常菌群．
故答案為：
（1）干熱滅菌   高壓蒸汽滅菌
（2）稀釋涂布平板法     菌落的形態(tài)、大小、隆起程度和顏色等特征    因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的種類和數(shù)目
（3）S1    250mg．kg^-1
（4）食用后會(huì)被人體消化，不會(huì)改變?nèi)梭w腸道內(nèi)正常菌群

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物分離和培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生能夠掌握實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法，識(shí)記平板劃線法和稀釋涂布平板法的不同應(yīng)用，并能夠結(jié)合曲線圖中的相關(guān)信息準(zhǔn)確答題．