Question

【題目】回答下列關于基因工程的相關問題：

（1）獲取目的基因及目的基因和運載體結合的過程需要用到的工具酶有________________。質粒DNA分子上有特殊的___________，供重組DNA的鑒定和選擇。

（2）獲得目的基因后，利用PCR技術將該基因擴增時，需要添加的有機物質除了模板、原料外，還應加入___________。將目的基因導入植物細胞采用最多的方法是________________。

（3）基因工程技術中，科學家可以從基因文庫中獲取目的基因，基因文庫包括基因組文庫和cDNA文庫，后者比較小，原因是_________________________________________。

（4）若要檢測目的基因是否轉錄和翻譯，采用的檢測方法分別是________________。

（5）基因治療是指把_______導入病人體內，使該基因的表達產物發(fā)揮功能，從而達到治療疾病的目的，這是治療遺傳病的最有效的手段。

Answer 1

【答案】限制酶、DNA連接酶 標記基因 引物、Taq酶（或耐高溫的DNA聚合酶） 農桿菌轉化法 cDNA文庫是通過某種生物發(fā)育的某個時期mRNA反轉錄產生的多種互補DNA片段，在這個時期并不是所有的基因都進行轉錄 分子雜交和抗原-抗體雜交技術 正常基因

【解析】

基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣.將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術.個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）獲取目的基因及目的基因和運載體結合的過程需要用到的工具酶有限制酶、DNA連接酶。質粒DNA分子上有特殊的標記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。

（2）PCR技術擴增目的基因時，需要添加的有機物質除了模板、原料外，還應加入引物、Taq酶（或耐高溫的DNA聚合酶）。將目的基因導入植物細胞常用的方法是農桿菌轉化法。

（3）cDNA文庫是通過某種生物發(fā)育的某個時期mRNA反轉錄產生的多種互補DNA片段，在這個時期并不是所有的基因都進行轉錄，故cDNA文庫比基因組文庫小。

（4）若要檢測目的基因是否轉錄和翻譯，采用的檢測方法分別是分子雜交和抗原-抗體雜交技術。

（5）基因治療是指把正常基因導入病人體內，使該基因的表達產物發(fā)揮功能，從而達到治療疾病的目的。