【題目】類胡蘿卜素是一種常用的食品色素,并常用于臨床治療夜盲癥等疾病。類胡蘿卜素的主要來源是化學合成或從植物中提取,成本較高?蒲腥藛T嘗試從光合細菌中提取類胡蘿卜素,流程如下:

(1)將少量污泥樣品接入液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)基中加入銨鹽和谷氨酸鈉為光合細菌的生長提供__________,培養(yǎng)基中沒有加入有機碳,從功能上看這種培養(yǎng)基屬于_______培養(yǎng)基。

(2)②將樣品涂布到固體培養(yǎng)基之前要進行梯度稀釋,為了防止混淆,應該在培養(yǎng)皿的________部位做好標記。從固體平板中挑選紫色非硫細菌(某光合細菌)的菌落,萃取效率主要取決于萃取劑的性質(zhì)。通過③接種到新鮮培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng),②、③過程需要重復幾次,目的是 ______________。

(3)從浸提離心干燥后的菌體中提取胡蘿卜素常用萃取法,萃取劑應該具有的特點是______________,萃取液的濃縮可直接使用_______裝置。

(4)鑒定所提取的胡蘿卜素樣品常用的方法是__________,鑒定過程中需用_________作為對照。

【答案】 氮源 選擇 底部 分離得到紫色非硫細菌的純凈培養(yǎng)物 具有較高的沸點,能溶解色素并且不與水混溶 蒸餾 紙層析法 胡蘿卜素標準品

【解析】試題分析:提取胡蘿卜素的實驗流程:胡蘿卜→粉碎→干燥→萃取→過濾→濃縮→胡蘿卜素,胡蘿卜素是化學性質(zhì)穩(wěn)定、橘黃色結(jié)晶,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有機溶劑,根據(jù)胡蘿卜素化學性質(zhì)穩(wěn)定、易溶于有機溶劑的特點,選用萃取法,胡蘿卜素不具有揮發(fā)性,不能選用蒸餾法。圖中①表示將樣品中菌種接種到液體培養(yǎng)基培養(yǎng);②表示將菌種混合液接種到固體培養(yǎng)基培養(yǎng),用的是稀釋涂布平板法,③表示將菌種接種到液體培養(yǎng)基中培養(yǎng),是稀釋的過程。

(1)培養(yǎng)基中的銨鹽和谷氨酸鈉能夠為微生物的培養(yǎng)提供氮源;培養(yǎng)基中沒有加入有機碳,光合細菌可以利用空氣中的二氧化碳進行光合作用,而其他微生物不可以,所以該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

(2)在稀釋涂布平板法中,每個培養(yǎng)皿的底部做上標記,以區(qū)別不同的稀釋梯度。圖中②、③不斷的稀釋、涂布,目的是分離得到紫色非硫細菌的純凈培養(yǎng)物。

(3)根據(jù)胡蘿卜素化學性質(zhì)穩(wěn)定、易溶于有機溶劑,具有較高的沸點等特點,選用萃取法,胡蘿卜素不具有揮發(fā)性,不能選用蒸餾法。萃取液的濃縮可直接使用蒸餾裝置。

(4)鑒定胡蘿卜素常用紙層析法,鑒定的結(jié)果需要與胡蘿卜素標準品做對比。

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(2)在適宜的條件下進行體外培養(yǎng),癌細胞能夠________,在此過程中細胞內(nèi)的DNA含量將持續(xù)出現(xiàn)周期性的變化。下圖表示癌細胞在一定濃度的蜂毒素培養(yǎng)液中培養(yǎng)幾小時后,DNA含量不同的細胞數(shù)。據(jù)此推測,蜂毒素能將癌細胞阻斷在有絲分裂的________期。

(3)研究表明,阻斷癌細胞增殖周期可引起細胞凋亡。科研人員為研究蜂毒素對人胃癌細胞的影響及作用機制,進行了以下實驗。請完善實驗并回答問題。

①方法步驟

a.取4只相同的培養(yǎng)瓶,編號,分別加入等量的完全培養(yǎng)液并接種等量離體胃癌細胞。

b1號培養(yǎng)瓶為空白對照,向24號培養(yǎng)瓶中分別加入________

μg/mL蜂毒素溶液。

c.培養(yǎng)48小時后,檢測并統(tǒng)計________________________,結(jié)果如圖1所示。

d.重復a、b步驟,檢測凋亡基因(Bax、Bel2)的表達,結(jié)果如圖2所示。

②分析討論

a.圖1表明____________________________________________。

b.圖1、圖2表明:從基因水平上看,蜂毒素誘導胃癌細胞凋亡與_______有關。當Bel2蛋白/Bax蛋白的比值出現(xiàn)________趨勢時,將會誘導胃癌細胞凋亡。

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