Question

回答下列有關(guān)植物細(xì)胞融合和培養(yǎng)的問題．
花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因．用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力．再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株．流程如圖1．

（1）植物細(xì)胞融合技術(shù)中過程①需要利用

 

 酶去除細(xì)胞壁，獲得具有活力的原生質(zhì)體．過程②用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞融合，細(xì)胞層面可能會得到兩兩融合的細(xì)胞類型有

 

種．供體葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體與根細(xì)胞原生質(zhì)體比較所特有的結(jié)構(gòu)是

 

，該結(jié)構(gòu)的有無可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志．
（2）③④培養(yǎng)過程中在培養(yǎng)基成分上的區(qū)別主要是

 

的不同．④過程還先后包括下列哪些操作順序

 

．
①誘導(dǎo)形成芽�、谌『线m外植體�、壅T導(dǎo)形成未分化狀態(tài)的細(xì)胞�、苷T導(dǎo)形成根
（3）采用特異性引物對花椰菜和黑芥基因組DNA 通過PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，可以得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定．圖2是用該引物對雙親及再生植株1-4 基因組DNA進(jìn)行擴(kuò)增的結(jié)果．據(jù)圖判斷，再生植株1-4中一定是雜種植株的有

 

．

（4）若要篩選出具有高抗性的雜種植株．可對以上雜種植株分別進(jìn)行

 

接種實(shí)驗(yàn)．

Answer 1

考點(diǎn)：植物體細(xì)胞雜交的過程,PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用,植物培養(yǎng)的條件及過程

專題：

分析：據(jù)圖可知，過程①去除細(xì)胞壁，獲得具有活力的原生質(zhì)體．過程②是誘導(dǎo)細(xì)胞融合．愈傷組織是高度液泡化，無規(guī)則、排列疏松、無定形狀態(tài)薄壁細(xì)胞組織（色淺）．誘導(dǎo)愈傷組織應(yīng)該避光培養(yǎng)，是因?yàn)樵谟泄鈺r往往形成維管組織，而不形成愈傷組織．愈傷組織再分化成胚狀體是需要光照，原因是：①葉綠素的合成需要光照；②試管苗需要光進(jìn)行光合作用制造有機(jī)物提供營養(yǎng)物．脫分化和再分化過程中，細(xì)胞主要的增殖方式是：有絲分裂．決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是：植物激素的種類和比例．

解答： 解：（1）植物細(xì)胞融合技術(shù)中首先需要利用酶解法（如纖維素酶和果膠酶）去除細(xì)胞壁，獲得具有活力的原生質(zhì)體．過程②用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞融合，細(xì)胞層面可能會得到兩兩融合的細(xì)胞類型有3種，如花椰菜-野生黑芥細(xì)胞、野生黑芥-野生黑芥細(xì)胞、花椰菜-花椰菜細(xì)胞．供體葉肉細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞能進(jìn)行光合作用，但根細(xì)胞不能進(jìn)行光合作用，相比之下，供體葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體比較所特有的結(jié)構(gòu)是葉綠體．
（2）③④培養(yǎng)過程是脫分化和再分化過程，決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是：植物激素的種類和比例．特別是生長素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要，被稱為“激素杠桿”．
（3）如果是雜種植株，一定含有花椰菜和黑芥全部或部分基因組DNA，由此可判斷1、2、4一定是雜種植株．
（4）野生黑芥具有黑腐病的抗性基因，若要篩選出具有獲得抗黑腐病雜種植株，可對以上雜種植株分別進(jìn)行黑腐病菌接種實(shí)驗(yàn)．如果能夠抵抗黑腐病菌侵染，說明了實(shí)驗(yàn)成功了；如果不能抵抗，說明實(shí)驗(yàn)不成功．
故答案為：
（1）纖維素酶和果膠酶      3      葉綠體
（2）細(xì)胞分裂素和生長素的比例     ①④
（3）1、2、4
（4）黑腐病菌

點(diǎn)評：本題考查了植物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識，意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系；理論聯(lián)系實(shí)際，綜合運(yùn)用所學(xué)知識解決自然界和社會生活中的一些生物學(xué)問題的能力和從題目所給的圖形中獲取有效信息的能力．