Question

【題目】圖1表示含有目的基因D的DNA片段長度（bp即堿基對）和部分堿基序列，其等位基因d位于圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對為T-A，圖2表示某質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列。現(xiàn)有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4種限制性核酸內(nèi)切酶，它們識別的堿基序列和酶切位點分別為C↓CGG、G↓GATCC，↓GATC、CCC↓GGG。下列有關(guān)敘述不正確的是

A. 若用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段，產(chǎn)生的DNA片段有537bp、790bp、 661bp三種長度

B. 從雜合子中分離出圖1及其對應(yīng)的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，得到5種不同長度的DNA片段

C. 若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進(jìn)行連接，形成重組質(zhì)粒，則應(yīng)選用BamHⅠ

D. 為了篩選出含有上述重組質(zhì)粒的大腸桿菌，可選擇添加抗生素B的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)

Answer 1

【答案】B

【解析】SmaⅠ識別的序列為CCCGGG，切割會產(chǎn)生平末端；圖1中DNA片段含有兩個SmaⅠ識別位點，第一個識別位點在左端534 bp序列向右三個堿基對的位置；第二個識別位點在右端658bp序列向左三個堿基的位置，從而兩個位點切割后產(chǎn)生的DNA片段的長度分別為534+3，796-3-3，658+3，即得到的DNA片段長度為537bp、790bp、661bp，A正確；在雜合子體內(nèi)含有基因D和基因d，基因D的序列中含有兩個識別位點，經(jīng)過SmaI完全切割會產(chǎn)生537bp、790bp和661bp三種不同長度的片段，基因d的序列中含有一個識別位點，經(jīng)過切割后會產(chǎn)生1327bp和661bp兩種長度的片段，綜上所述，雜合子中分離到該基因的DNA片段經(jīng)過切割后會產(chǎn)生4種不同長度的片段，B錯誤；能夠獲取目的基因并切開質(zhì)粒的限制酶有識別序列為GGATCC的BamH I和識別序列為GATC的MboI，若使用Mbo I會同時破壞質(zhì)粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因，所以要用BamHI來切割目的基因和質(zhì)粒，切割后保留了完整的抗生素B抗性基因，便于篩選出含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌，C正確；用限制酶BamHⅠ切割質(zhì)粒會破壞抗生素A抗性基因，但不會破壞抗生素B抗性基因，所以導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌能在含有抗生素B的培養(yǎng)基上生存，因此為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，一般需要用添加抗生素B的培養(yǎng)基培養(yǎng)，D正確。