Question

【題目】養(yǎng)蠶、繅絲、織綢等蠶業(yè)在我國(guó)已有四千多年的歷史。在蠶絲加工過(guò)程中，需要將蠶絲中的絲膠（化學(xué)成分主要為蛋白質(zhì)）從絲纖維上分離下來(lái)，用酶進(jìn)行蠶絲脫膠成本低、效率高且污染少。回答相關(guān)問(wèn)題：

（1）蠶絲脫膠酶只分解絲膠不分解絲纖維，表明絲纖維蛋白與絲膠蛋白在結(jié)構(gòu)上有________（填“少許”或“明顯”）區(qū)別。為了獲得能產(chǎn)生用于蠶絲脫膠且對(duì)絲纖維損傷小的蛋白酶的微生物單菌落，可從絲廠周邊土壤中取樣，并應(yīng)選用以________為碳源的_______培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。

（2）若要測(cè)定培養(yǎng)液中微生物的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用_______________直接計(jì)數(shù)；若要測(cè)定其活菌數(shù)量，可選用___________________法進(jìn)行計(jì)數(shù)。

（3）酶脫膠在_____________溫下進(jìn)行，菌株產(chǎn)酶能力及酶活力還受初始發(fā)酵pH影響。為了確定獲得產(chǎn)酶發(fā)酵最適初始pH，某同學(xué)測(cè)得相同時(shí)間內(nèi)，在pH值為7、10、12時(shí)降解10g蠶絲粗品的脫膠活力相對(duì)值依次為7、10．5、5、9．8。為了進(jìn)一步確定所選菌株發(fā)酵產(chǎn)酶的最適初始pH，接下來(lái)的實(shí)驗(yàn)思路是：_____________________________________________。

（4）所獲得的菌種需要長(zhǎng)期保藏，可以采用_________________的方法，通常需要在________________________中保存。

Answer 1

【答案】明顯??? 蛋白質(zhì)??? 固體??? 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板??? 稀釋涂布平板??? 常??? 應(yīng)圍繞pH值10設(shè)計(jì)系列梯度pH，在相同時(shí)間內(nèi)，測(cè)得各pH下降解一定量蠶絲粗品絲膠的脫膠活力相對(duì)值，最大脫膠活力相對(duì)值時(shí)的初始pH即為最適初始pH??? 甘油管藏??? 冷凍冰箱???

【解析】

酶具有專一性的特性，蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)不同形式的功能也有差別，因此不同的蛋白質(zhì)可能需要不同的酶分析。微生物的計(jì)數(shù)可以使用顯微鏡觀察法直接觀察細(xì)胞的個(gè)數(shù)，也可以使用稀釋涂布平板法間接計(jì)算微生物的數(shù)量。

（1）絲纖維蛋白與絲膠蛋白在結(jié)構(gòu)上有明顯的差異使得酶不能識(shí)別從而不能催化分解；由于生產(chǎn)生需要對(duì)蠶絲脫膠且對(duì)絲纖維損傷小，因此想要使用酶分解絲膠蛋白，所以應(yīng)該使用以蛋白質(zhì)為唯一碳源的固體培養(yǎng)基做選擇培養(yǎng)；

（2）微生物的直接計(jì)數(shù)方法為顯微鏡計(jì)數(shù)法，間接計(jì)數(shù)的方法為稀釋涂布平板法，一般稀釋涂布平板法可以對(duì)活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)；

（3）酶具有反應(yīng)條件溫和的特點(diǎn)，作用溫度要求常溫；該題中所研究的PH數(shù)據(jù)中，在pH為10時(shí)具有較強(qiáng)的分解能力，因此可以設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)圍繞pH值10設(shè)計(jì)系列梯度pH，在相同時(shí)間內(nèi)，測(cè)得各pH下降解一定量蠶絲粗品絲膠的脫膠活力相對(duì)值，最大脫膠活力相對(duì)值時(shí)的初始pH即為最適初始pH；

（4）菌種的保藏中長(zhǎng)期保藏需要使用甘油管藏，需要溫度為零下4攝氏度，因此在冷凍冰箱保存。