Question

【題目】請(qǐng)分析回答下列有關(guān)現(xiàn)代生物科技方面的問(wèn)題：

（1）基因工程的基本操作程序主要包括四個(gè)步驟：第一步是目的基因的獲取，第二步是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，第三步是將目的的基因?qū)�入受體細(xì)胞，第四步是 。

①通常在第一步和第二步的操作中都需要的工具酶是 。

②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的過(guò)程中，目的基因受熱形成單鏈并與引物結(jié)合，在 酶的作用下延伸形成DNA。

③采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞后，培養(yǎng)該細(xì)胞再生成植株的過(guò)程中，往往需要使用植物激素，人為地控制 和 過(guò)程。

④蛋白質(zhì)工程的基本程序是：

預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的 序列→找到相對(duì)應(yīng)的 序列。

（2）請(qǐng)回答下列有關(guān)單克隆抗體制備的問(wèn)題：

①與動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程相比，植物體細(xì)胞雜交在細(xì)胞融合之前要用 處理。作用是去除 ,誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的化學(xué)方法是用 。

②經(jīng)人工誘導(dǎo)后，骨髄痛細(xì)胞和產(chǎn)生免疫反應(yīng)的動(dòng)物的脾臟細(xì)胞中的B淋巴細(xì)胞融合。由于可能產(chǎn)生多種融合細(xì)胞，因此還需對(duì)融合細(xì)胞用 進(jìn)行篩選，目的是選出 它的特點(diǎn)是 。單克隆抗體的特點(diǎn)是 。

Answer 1

【答案】

（1）目的基因的檢測(cè)與鑒定

①限制性核酸內(nèi)切酶（或限制酶）

②熱穩(wěn)定 DNA聚合

③脫分化 再分化

④氨基酸 脫氧核苷酸

（2）①纖維素酶和果膠酶 細(xì)胞壁 聚乙二醇

②選擇性培養(yǎng)基 雜交瘤細(xì)胞 既能迅速無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生專一抗體 特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備

【解析】

（1）基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲��；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與鑒定。

①基因工獲取目的基因，需要限制酶，基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程首先需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運(yùn)載體，其次需要DNA連接酶將目的基因和運(yùn)載體連接形成重組DNA分子，因此通常在第一步和第二步的操作中都需要的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶。②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的過(guò)程中，目的基因受熱形成單鏈并與引物結(jié)合，在DNA聚合酶的作用下延伸形成DNA，這種DNA聚合酶具有熱穩(wěn)定性。③采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞后，培養(yǎng)該細(xì)胞再生成植株的過(guò)程中，往往需要使用植物激素，人為地控制細(xì)胞的脫分化、再分化。

④蛋白質(zhì)工程的基本原理是：預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的序脫氧核苷酸。

（2）①植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中，在細(xì)胞融合之前要用纖維素酶和果膠酶處理，以去除細(xì)胞壁，誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的化學(xué)方法是用聚乙二醇。

②經(jīng)人工誘導(dǎo)后，骨髓瘤細(xì)胞和產(chǎn)生免疫反應(yīng)的動(dòng)物的脾臟細(xì)胞中的B淋巴細(xì)胞融合，由于可能產(chǎn)生多種融合細(xì)胞，因此還需對(duì)融合細(xì)胞進(jìn)行選擇性培養(yǎng)基，來(lái)篩選和檢測(cè)，從而獲得符合要求的雜交瘤細(xì)胞。通過(guò)能產(chǎn)生單一抗體的效應(yīng)B細(xì)胞（漿細(xì)胞）和骨髓瘤細(xì)胞雜交，形成的雜交瘤細(xì)胞既能產(chǎn)生特定的抗體，又能無(wú)限增殖，通過(guò)培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞獲得的抗體即為單克隆抗體，單克隆抗體的特點(diǎn)是靈敏度高、專一性強(qiáng)，可大量制備。