Question

19．組織型纖溶酶原激活劑（tPA）在人體纖溶和凝血的平衡調節(jié)中發(fā)揮著關鍵性的作用，現(xiàn)欲利用基因工程技術將tPA基因導入奶牛成纖維細胞中，并通過核移植技術獲得克隆轉基因奶牛，最后從奶牛乳汁中獲取組織型纖溶酶原激活劑．請回答：
（1）為獲得大量tPA基因，可將其連接到質粒上，通過大腸桿菌培養(yǎng)擴增．構建重組DNA分子時，需要用到的工具酶有限制酶和DNA連接酶，為了便于檢測目的基因是否成功導入受體成纖維細胞中，重組DNA分子上要有標記基因．
（2）核移植時，需將成纖維細胞的細胞核移人去核卵細胞中獲得重組細胞，部分原因是卵細胞的細胞質具有調控細胞核發(fā)育的作用．通過早期胚胎培養(yǎng)技術，將重組細胞培養(yǎng)成早期囊胚．將早期囊胚移植到代孕受體之前需要經過同期發(fā)情處理，以便成功植人或著床．
（3）為了繁殖更多后代，可以通過胚胎分割技術，產生同卵多仔．下列關于該技術的敘述，錯誤的是D．
A．增加胚胎數(shù)量，快速繁殖 B．可以采用相關酶處理卵裂球
C．該技術涉及顯微操作技術 D．同卵多仔的表現(xiàn)型一定相同．

Answer 1

分析 1、胚胎分割的主要儀器設備：實體顯微鏡和顯微操作儀；胚胎分割的特點：來自同一個胚胎的后代具有相同的遺傳物質．
2、胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質和正常繁殖能力的受體．用激素進行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對胚胎進行質量檢查，此時的胚胎應發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對胚胎進行移植；⑤移植后的檢查．
3、基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）為獲得大量tPA基因，可將其連接到質粒上，通過大腸桿菌培養(yǎng)擴增．構建基因表達載體時，首先需要限制酶切割運載體和含有目的基因的外源DNA分子，其次要求DNA連接酶將目的基因與運載體連接形成重組DNA；為了便于檢測目的基因是否成功導入受體成纖維細胞中，重組DNA分子上要有標記基因．
（2）核移植時，需將成纖維細胞的細胞核移人去核卵細胞中獲得重組細胞，部分原因是卵細胞的細胞質具有調控細胞核發(fā)育的作用．通過早期胚胎培養(yǎng)技術，將重組細胞培養(yǎng)成早期囊胚．胚胎移植前，需要經過同期發(fā)情處理，使供受體的生理狀態(tài)相同，以便成功植人或著床．
（3）A．胚胎分割技術能增加胚胎數(shù)量，快速繁殖，A正確；
B．不同階段的胚胎進行胚胎分割時，可采用的方法有一定的差別，若胚胎處于卵裂期可以采用酶解法或機械法，若囊胚則只能運用機械法分割，且要求等份分割，B正確；
C、胚胎分割技術涉及顯微操作技，C正確；
D．生物的性狀由基因型與環(huán)境共同決定，因此同卵多仔的基因型相同，但表現(xiàn)型一定相同，D錯誤．
故選：D．
故答案為：
（1）質粒       限制酶和DNA連接酶     標記基因 
（2）細胞核      早期胚胎培養(yǎng)      同期發(fā)情 
（3）D

點評 本題考查基因工程和胚胎工程的相關知識，要求考生識記基因工程的概念、原理、操作工具及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)；識記胚胎移植的基本程序及胚胎分割技術的注意事項，能結合所學的知識準確判斷各選項．