Question

【題目】下圖是培育轉基因山羊，并通過乳腺生物反應器來生產人β-酪蛋白的流程圖。請分析并回答下列問題：

（1）過程①構建重組基因表達載體時，需要的工具酶有_________。過程②將目的基因導入受精卵時常用的方法是_________，選用受精卵作為受體細胞的原因是____________________________________。

（2）要實現超數排卵，應在山羊發(fā)情周期的某一階段用_________處理。獲得的精子需要進行_________后才具有受精能力。

（3）早期胚胎一般發(fā)育到_________時期，再經過程③將其移植到受體母羊體內。對移植前的胚胎進行性別鑒定時，宜取囊胚期的________細胞進行鑒定，一般采用SRY—PCR方法，選擇出現陰性反應的_________（性別）胚胎進行移植。

Answer 1

【答案】限制酶和DNA連接酶 顯微注射法 受精卵的全能性最高，能發(fā)育成個體 促性腺激素 獲能處理 桑椹胚或囊胚 滋養(yǎng)層 雌性

【解析】

分析題圖：圖示為培育轉基因山羊生產人β-酪蛋白的流程圖，其中①表示基因表達載體的構建過程，②表示將基因表達載體導入受體細胞受精卵，③表示胚胎移植過程，④表示人β-酪蛋白基因表達。

（1）基因工程的過程中需要用限制酶切割目的基因和質粒，再用DNA連接酶將兩者連接，故過程①表示構建重組基因表達載體，在這個過程中需要用到限制酶和DNA連接酶；過程②是將目的基因導入受體細胞受精卵，常用的方法是顯微注射法；由于動物細胞全能性受到限制，只有細胞核具有全能性，而受精卵的全能性最高，能發(fā)育成個體，故常選用受精卵作為受體細胞。

（2）促性腺激素能促進性腺發(fā)育及性激素的分泌，故要實現超數排卵，應在山羊發(fā)情周期的某一階段用促性腺激素處理；獲得的精子需要進行獲能處理后才具有受精能力。

（3）由于桑椹胚或囊胚的胚胎還沒有和母體建立聯系，故早期胚胎一般發(fā)育到桑椹胚或囊胚時期，再經過程③將其移植到受體母羊體內；滋養(yǎng)層的細胞將來發(fā)育成胎膜胎盤，對移植前的胚胎進行性別鑒定時，宜取囊胚期的滋養(yǎng)層細胞進行鑒定；SRY—PCR方法是用來檢測Y染色體的，一般采用SRY—PCR方法進行性別鑒定，選擇出現陰性反應的即為雌性動物胚胎進行移植。