Question

19．研究人員為了獲得用于煙氣脫硫的脫硫細菌，進行了相關(guān)實驗．回答下列問題：
（1）獲取菌種：在某熱電廠煙囪周圍區(qū)域采集土樣，取樣用的小鐵鏟和盛裝土樣的信封在使用前都需要滅菌．為了獲得目的菌種，應(yīng)該將采集的土樣進行稀釋處理后，然后接種到培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)一般包括碳源、氮源、水和無機鹽．
（2）分離目的菌：將目的菌轉(zhuǎn)移到含少量無菌水的錐形瓶中，邊攪拌邊持續(xù)通入SO₂氣體，馴化幾分鐘后接種到固體培養(yǎng)基上，待長出菌落后再重復(fù)上述步驟，并逐步延長通SO₂的時間，與此同時逐步降低培養(yǎng)基的pH．由此分離得到的脫硫細菌具有較強的利用SO₂和耐酸的能力．
（3）活菌計數(shù)：為獲得大量的目的菌用于生產(chǎn)，在培養(yǎng)過程中技術(shù)人員需連續(xù)取樣進行計數(shù)．稀釋涂布平板法常用來統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)目，當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，因此，統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)即可推測出樣品中含有的活菌數(shù)目．通常情況下，用此計數(shù)方法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往 比活菌的實際數(shù)目低（高/低），這是因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落．
（4）檢測脫硫細菌對抗生素的敏感性：取該單菌落適當 稀釋后的液體2滴，接種于固體培養(yǎng)基表面，并用
涂布器使菌液均勻分布．在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時后，將大小相同且分別含有三種抗生素的濾紙片均勻置于該平板的不同位置，再培養(yǎng)一段時間后，結(jié)果如圖所示（濾紙片周圍的白色區(qū)域表示沒有菌落分布），據(jù)此實驗結(jié)果推測，三種抗生素中對該菌抑制作用最強的是青霉素．

Answer 1

分析 1、根據(jù)實驗?zāi)康目芍�，實驗需要獲得“煙氣脫硫的脫硫細菌”，因此需要使用選擇培養(yǎng)基將該菌篩選出，即題中的“馴化”．
2、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落．

解答 解：（1）為了防止雜菌的污染，取樣用的小鐵鏟和盛裝土樣的信封在使用前都需要滅菌．為了獲得目的菌種，應(yīng)該將采集的土樣進行稀釋處理后，然后接種到培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)；培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)一般包括碳源、氮源、水和無機鹽．
（2）根據(jù)馴化過程可知，馴化過程中不斷通入SO₂，并且延長時間，與此同時逐步降低培養(yǎng)基的pH，因此分離得到的脫硫細菌具有較強的利用SO₂和耐酸的能力．
（3）稀釋涂布平板法常用來統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)目，當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，因此，統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)即可推測出樣品中含有的活菌數(shù)目．由于當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此用此計數(shù)方法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低．
（4）用稀釋涂布平板法接種時所用的涂布工具是涂布器．在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時后，將大小相同且分別含有三種抗生素的濾紙片均勻置于該平板的不同位置，再培養(yǎng)一段時間后，結(jié)果如圖所示（濾紙片周圍的白色區(qū)域表示沒有菌落分布），據(jù)此實驗結(jié)果推測，三種抗生素中對該菌抑制作用最強的是青霉素．
故答案為：
（1）滅菌  稀釋   碳源、氮源
（2）利用SO₂ 耐酸
（3）一個活菌   低    當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落
（4）涂布器  青霉素

點評 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記接種微生物常用的兩種方法；識記培養(yǎng)基的成分、種類及功能，能結(jié)合題中和圖中信息準確答題．