Question

19．目的基因與載體結(jié)合所需的條件一般有（　　）
①同種限制酶　 ②具有抗性基因的質(zhì)粒�、跼NA聚合酶　  ④目的基因�、軩NA連接酶�、匏姆N脫氧核苷酸．

• A． ①②③④⑤⑥
• B． ①②④⑤⑥③
• C． ①②③④⑤
• D． ①②④⑤

Answer 1

分析 基因表達載體的構(gòu)建：
1、目的：使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代并表達和發(fā)揮作用．
2、基因表達載體的組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因．
（1）啟動子在基因的首段，它是RNA聚合酶的結(jié)合位點，能控制著轉(zhuǎn)錄的開始；
（2）終止子在基因的尾端，它控制著轉(zhuǎn)錄的結(jié)束；
（3）標記基因便于目的基因的鑒定和篩選．

解答 解：①構(gòu)建基因表達載體時，首先要用同種限制酶切割運載體和含有目的基因的DNA片段，①正確；　
②構(gòu)建基因表達載體時需要運載體，運載體一般是具有抗性基因的質(zhì)粒，②正確；　
③RNA聚合酶能催化轉(zhuǎn)錄過程，但基因表達載體的構(gòu)建過程不需要RNA聚合酶，③錯誤；　 
④構(gòu)建基因表達載體時需要目的基因，④正確；　
⑤構(gòu)建基因表達載體時需要DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組DNA分子，⑤正確；　
⑥構(gòu)建基因表達載體時，不需要四種脫氧核苷酸，⑥錯誤．
故選：D．

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)問題，能結(jié)合所學的知識準確判斷各選項．