Question

12．自生固氮菌是一類能獨(dú)立固定氮?dú)獾募?xì)菌，其中有些好氧的種類能產(chǎn)生PHB（一種可以被生物降解的塑料）．現(xiàn)欲獲得高產(chǎn)PHB的自生固氮菌菌種，操作流程如下：采集土樣→富集培養(yǎng)→分離、純化培養(yǎng)→初步篩選PHB固氮菌→篩選高產(chǎn)PHB固氮菌→保存?zhèn)溆茫�回答下列�?wèn)題：
（1）富集培養(yǎng)時(shí)，為達(dá)到篩選自生固氮菌的目的，在配制培養(yǎng)液時(shí)不應(yīng)添加含氮物質(zhì)（氮源）．培養(yǎng)時(shí)要將裝有培養(yǎng)液的錐形瓶放置在搖床上，其目的是為細(xì)菌的生長(zhǎng)提供充足的氧氣．
（2）進(jìn)行分離、純化培養(yǎng)時(shí)，要先將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中，制成平板．此時(shí)所使用的培養(yǎng)基與富集培養(yǎng)時(shí)有所不同，其中添加了一定量的瓊脂．倒平板時(shí)，要待高壓滅菌后的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右（或冷卻至不燙手），再在酒精燈火焰附近操作．平板冷凝后，需置于恒溫箱中1-2天后再用于接種，目的是選出沒(méi)被微生物污染的平板．
（3）分離純化培養(yǎng)后，得到8種形態(tài)特征有所不同的單菌落．經(jīng)染色鑒定，其中3種能產(chǎn)生PHB．那么如何進(jìn)一步篩選出高產(chǎn)PHB的菌種呢？請(qǐng)說(shuō)出你的實(shí)驗(yàn)思路．將能產(chǎn)生PHB的三種菌分別接種到相同的培養(yǎng)基上，在相同且適宜的條件下培養(yǎng)相同時(shí)間，檢測(cè)和比較三種菌的PHB生成量．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基按功能分：

種類	制備方法	特征	用途
選擇培養(yǎng)基	培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分	根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養(yǎng)基	加入某種試劑或化學(xué)藥品	依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì)	鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌

2、純化微生物常用的方法
①平板劃線法：通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面．
②稀釋涂布平板法：將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)．

解答 解：（1）自生固氮菌是一類能獨(dú)立固定氮?dú)獾募?xì)菌，因此富集培養(yǎng)時(shí)，為達(dá)到篩選自生固氮菌的目的，在配制培養(yǎng)液時(shí)不應(yīng)添加含氮物質(zhì)（氮源）．培養(yǎng)時(shí)要將裝有培養(yǎng)液的錐形瓶放置在搖床上，其目的是為細(xì)菌的生長(zhǎng)提供充足的氧氣．
（2）進(jìn)行分離、純化培養(yǎng)時(shí)，要先將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中，制成平板．此時(shí)所使用的培養(yǎng)基與富集培養(yǎng)時(shí)有所不同，為固體培養(yǎng)基，因此培養(yǎng)皿中需添加了一定量的瓊脂．倒平板時(shí)，要待高壓滅菌后的培養(yǎng)基 冷卻至50℃左右（或冷卻至不燙手），再在酒精燈火焰附近操作．平板冷凝后，需置于恒溫箱中1-2天后再用于接種，目的是選出沒(méi)被微生物污染的平板．
（3）分離純化培養(yǎng)后，得到8種形態(tài)特征有所不同的單菌落．經(jīng)染色鑒定，其中3種能產(chǎn)生PHB．進(jìn)一步篩選出高產(chǎn)PHB的菌種的實(shí)驗(yàn)思路為：將能產(chǎn)生PHB的三種菌分別接種到相同的培養(yǎng)基上，在相同且適宜的條件下培養(yǎng)相同時(shí)間，檢測(cè)和比較三種菌的PHB生成量．
故答案為：
（1）含氮物質(zhì)（氮源）       為細(xì)菌的生長(zhǎng)提供充足的氧氣
（2）瓊脂   冷卻至50℃左右（或冷卻至不燙手）     酒精燈火焰     選出沒(méi)被微生物污染的平板
（3）將能產(chǎn)生PHB的三種菌分別接種到相同的培養(yǎng)基上，在相同且適宜的條件下培養(yǎng)相同時(shí)間，檢測(cè)和比較三種菌的PHB生成量

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記培養(yǎng)基的成分、種類及功能；識(shí)記培養(yǎng)基的制作過(guò)程，能結(jié)合題中信息準(zhǔn)確答題．