Question

【題目】科研人員為了分離、篩選藍(lán)莓果酒專用酵母來改善藍(lán)莓果酒的品質(zhì)，進(jìn)行了如下實驗：

① 取不同品種成熟藍(lán)莓制果漿，置于恒溫培養(yǎng)箱中自然發(fā)酵至產(chǎn)生大量氣泡和明顯酒味；

② 將藍(lán)莓發(fā)酵液梯度稀釋后，進(jìn)行涂布平板操作，每個濃度梯度3個平板，并在恒溫下培養(yǎng)2d，根據(jù)酵母菌菌落特征挑取單菌落；

③ 將挑取的單菌落擴(kuò)大培養(yǎng)后，通過平板劃線法分離純化并保存；

④ 檢測篩選菌株的發(fā)酵性能，得到如下實驗結(jié)果。

品種	乙醇體積分?jǐn)?shù)/%					pH
	8%	10%	12%	14%	15%	4.00	2.98	2.03	1.48
葡萄釀酒酵母	++++	++++	+	-	-	++++	++++	-	-
BL-21	++++	+++	+	-	-	++++	++++	-	-
BF-09	++++	++++	++	-	-	++++	++++	+	-
BF-17	++++	++++	++	+	-	++++	++++	++	-

注：“-”表示不產(chǎn)氣；“+”表示產(chǎn)氣，“+”越多產(chǎn)氣越多。

請分析回答：

（1）步驟①恒溫培養(yǎng)箱的溫度控制在______左右，其主要目的是________________________。

（2）步驟②中，發(fā)酵液應(yīng)使用______進(jìn)行梯度稀釋。稀釋涂布平板法依據(jù)的原理是____________。

（3）配制培養(yǎng)某的主要步驟是：計算→稱量→溶化→ ______→倒平板。在接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是________________________。

（4）步驟③平板劃線時，常用的工具是接種環(huán)，對接種環(huán)的處理要求是__________________。

（5）固體培養(yǎng)基常用瓊脂作凝固劑，理想的凝固劑應(yīng)具有的特點是____________（多選）。

A．含有某些特殊的營養(yǎng)物質(zhì) B．消毒滅菌不會改變其特性

C．能被微生物分解和利用 D．微生物生長溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài)

E．配制方便且有良好的透明性

（6）根據(jù)實驗結(jié)果推知，____________（品種）是較理想的釀酒菌種。

Answer 1

【答案】20℃使酵母菌細(xì)胞快速生長、繁殖無菌水在稀釋度足夠高的菌液里，將聚集在一起的微生物分散成單個細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落滅菌檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格每次劃線前后都要用灼燒法對接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌BDEBF-17

【解析】

據(jù)題文的描述可知：該題考查學(xué)生對果酒的制作、微生物的純化培養(yǎng)與分離等相關(guān)知識的識記和理解能力，以及獲取信息、分析問題的能力。

(1) 果酒的制作，選用的菌種為酵母菌，20℃左右最適合酵母菌生長、繁殖�？梢�，為使酵母菌細(xì)胞快速生長、繁殖，步驟①恒溫培養(yǎng)箱的溫度應(yīng)控制在20℃左右。

(2) 步驟②中，發(fā)酵液應(yīng)使用無菌水進(jìn)行梯度稀釋。稀釋涂布平板法依據(jù)的原理是：在稀釋度足夠高的菌液里，將聚集在一起的菌種分散成單個細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。

(3) 平板培養(yǎng)基配制的基本流程為：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。為了檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，在接種前，需隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時間，觀察有無菌落形成，若沒有菌落形成，則說明滅菌合格。

(4) 步驟③平板劃線時，每次劃線前后都要用灼燒法對接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌，以殺死接種環(huán)上的微生物，避免污染培養(yǎng)物。

(5)凝固劑不能為微生物提供營養(yǎng)物質(zhì)，A錯誤；消毒滅菌不會改變凝固劑的特性，B正確；凝固劑不能被微生物分解和利用，C錯誤；凝固劑需要在微生物生長溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài)，D正確；凝固劑在配制培養(yǎng)基時，應(yīng)配置方便且有良好的透明性，E正確。

(6) 產(chǎn)氣是酵母菌的生命活動所引起。分析表中信息可知：當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)為14%時，只有BF-17有生物活性，當(dāng)pH為2.03時，有生物活性的釀酒菌種為BF-17與BF-09，但BF-17 的生命力強(qiáng)于BF-09，說明BF-17是較理想的釀酒菌種。