Question

現(xiàn)有甲、乙兩種可能有一定毒性的化學(xué)物質(zhì)，實(shí)驗(yàn)室研究人員欲通過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法來鑒定它們是否有毒性并比較二者毒性的強(qiáng)弱。請(qǐng)你以一個(gè)研究人員的身份參與此項(xiàng)研究，完成下列有關(guān)問題：   

 Ⅰ．實(shí)驗(yàn)原理：                                                 。

根據(jù)這種變異細(xì)胞占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)（以下稱Q值），可判斷該化學(xué)物質(zhì)的毒性。

 Ⅱ．材料用具：活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液、動(dòng)物細(xì)胞固定液、適宜濃度的龍膽紫溶液、適宜濃度的化學(xué)物質(zhì)甲溶液、適宜濃度的化學(xué)物質(zhì)乙溶液、蒸餾水、滴管、培養(yǎng)皿、剪刀、錐形瓶、恒溫箱、載玻片、蓋玻片、顯微鏡、小白鼠正常有絲分裂各時(shí)期的高倍顯微照片。

 Ⅲ．實(shí)驗(yàn)步驟：

 （1）制備細(xì)胞懸浮液。

把活的小白鼠胚胎放在培養(yǎng)皿中剪碎，轉(zhuǎn)入錐形瓶中，加入胰蛋白酶液處理，使胚胎組織離散成單個(gè)細(xì)胞，再加入動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液，制成細(xì)胞懸浮液。

 （2）進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。

①取A、B、C 3個(gè)潔凈的培養(yǎng)瓶，                        ；

②A、B兩個(gè)培養(yǎng)瓶中分別加入等量的甲、乙溶液。C瓶中加入等量的蒸餾水，搖勻；

③                                                        

（3）制作臨時(shí)裝片。

①當(dāng)細(xì)胞增殖到大約8代左右時(shí)，同時(shí)從恒溫箱中取出3個(gè)培養(yǎng)瓶，用胰蛋白酶液處理，加入動(dòng)物細(xì)胞固定液，迅速殺死細(xì)胞并固定細(xì)胞分裂相；

②靜置一段時(shí)間后，分別從各培養(yǎng)瓶底部吸取適量的細(xì)胞懸浮液，滴在與培養(yǎng)瓶有相同編號(hào)的載玻片的中央，                                    ，3min~5min后，蓋上蓋玻片。

（4）鏡檢和統(tǒng)計(jì)。

把臨時(shí)裝片放在顯微鏡下，先用低倍鏡后用高倍鏡，尋找處于             期的細(xì)胞，并與                  進(jìn)行對(duì)比，統(tǒng)計(jì)并計(jì)算該期變異的細(xì)胞占該期細(xì)胞總數(shù)的百分?jǐn)?shù)（Q值）。

Ⅳ．結(jié)果分析與結(jié)論：

（1）經(jīng)研究人員實(shí)驗(yàn)得知，A、B、C三個(gè)培養(yǎng)瓶的Q值依次為：QA=1.3%，QB=12.5%，QC=0.1%，由此可知該實(shí)驗(yàn)的結(jié)論是                                        。

（2）在實(shí)驗(yàn)中，C培養(yǎng)瓶起         作用，C瓶的Q值說明                    。

 

Answer 1

【答案】

Ⅰ．有毒物質(zhì)會(huì)使動(dòng)物細(xì)胞發(fā)生染色體變異   

Ⅲ．（2）①分別放入等量的細(xì)胞懸浮液    ③把3個(gè)培養(yǎng)瓶放在37℃（或適宜溫度）的恒溫箱中培養(yǎng)   

（3）②加1～2滴龍膽紫溶液染色   

（4）有絲分裂中     小白鼠正常細(xì)胞有絲分裂中期高倍顯微照片  

Ⅳ．（1）甲、乙兩種化學(xué)物質(zhì)均有毒性，且乙的毒性比甲的毒性大 

（2）對(duì)照    動(dòng)物細(xì)胞在正常培養(yǎng)狀態(tài)下染色體變異頻率非常低

【解析】Ⅰ．有毒物質(zhì)會(huì)使動(dòng)物細(xì)胞發(fā)生染色體變異，所以根據(jù)變異細(xì)胞占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)可判斷該化學(xué)物質(zhì)的毒性。

Ⅲ．該實(shí)驗(yàn)的自變量是有毒物質(zhì)的有無以及濃度，因變量是染色體的變異情況，所以需向三個(gè)培養(yǎng)瓶中加入等量的細(xì)胞懸浮液，并放在相同適宜溫度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。檢測(cè)染色體的方法是龍膽紫染液。

Ⅳ．QA>QC、QB>QC，說明甲、乙兩種化學(xué)物質(zhì)均有毒性，QB>QA，說明乙的毒性大于甲。C瓶起對(duì)照作用，C瓶中Q值>0，說明動(dòng)物細(xì)胞在正常培養(yǎng)狀態(tài)下變異頻率很低。