Question

6．天然釀酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶類，用作發(fā)酵原料的淀粉需經一系列復雜的轉化過程才能被利用．研究者從某絲狀真菌中獲取淀粉酶基因并轉人釀酒酵母菌，獲得的釀酒酵母工程菌可直接利用淀粉產生酒精．請回答下列問題：
（1）將淀粉酶基因切割下來所用的工具是限制酶（限制性內切酶），用將淀粉酶基因DNA連接酶與載體拼接成新的DNA分子，下一步將該DNA分子導入受體細胞，以完成工程菌的構建．
（2）若要鑒定淀粉酶基因是否插人釀酒酵母菌，可采用的檢測方法是DNA分子雜交技術；若要鑒定淀粉酶基因是否翻譯成淀粉酶，可采用抗原-抗體雜交或淀粉酶活性檢測．

Answer 1

分析 1、基因工程操作的工具是限制性內切酶、DNA連接酶和運載體．
2、基因工程操作的步驟為提取目的基因、目的基因與運載體結合、將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測與表達．
3、目的基因的檢測有多種手段，如①DNA分子雜交技術；②分子雜交技術；③抗原-抗體雜交技術．
4、運載體通常用動植物病毒和質粒，質粒通常為小型環(huán)狀的DNA分子．
5、重組DNA分子受體細胞的機率比較小，對是否導入和表達還需要進行檢測．

解答 解：（1）將目的基因（淀粉酶基因）切割下來所用的工具是限制酶，將淀粉酶基因和運載體連接起來需要DNA連接酶，之后將重組DNA分子導入受體細胞，以完成工程菌的構建．
（2）檢測目的基因是否導入受體細胞，可采用DNA分子雜交技術；要鑒定目的基因是否翻譯成蛋白質，可采用抗原抗體雜交技術；因為該工程菌產生的淀粉酶可分泌至培養(yǎng)基，水解淀粉后的區(qū)域，遇碘不再變藍色，產生透明圈．所以也可以通過檢測淀粉酶活性來檢測目的基因是否翻譯成蛋白質，即將該工程菌接種在含淀粉的固體平板培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一定時間后，加入碘液檢驗，并檢驗工程菌菌落周圍是否出現透明圈．
故答案為：
（1）限制酶（限制性內切酶） DNA連接酶 導入受體細胞
（2）DNA分子雜交技術 抗原-抗體雜交或淀粉酶活性 會

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的工具和操作步驟，能應用基因工程技術培育獲得的釀酒酵母工程菌，屬于考綱識記和理解層次的考查，這類試題需要考生在平時的學習過程中學會構建知識網絡結構．