Question

某校生物興趣小組的同學(xué)對(duì)洞庭湖水體中的微生物種類進(jìn)行了調(diào)查，并且分離出了一種能分解蘆葦纖維素莖稈的細(xì)菌，對(duì)細(xì)菌培養(yǎng)后進(jìn)行了計(jì)數(shù)，請(qǐng)據(jù)所學(xué)知識(shí)回答下列問題：
（1）培養(yǎng)基中一般含有微生物生長(zhǎng)所需的水、無(wú)機(jī)鹽、

 

等；培養(yǎng)基滅菌時(shí)采用的方法是

 

，接種時(shí)要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行

 

．
（2）從眾多細(xì)菌中篩選出能分解蘆葦纖維素的細(xì)菌，應(yīng)選擇以

 

的培養(yǎng)基，對(duì)蘆葦纖維素分解菌計(jì)數(shù)時(shí)，常采用的方法是

 

．
（3）當(dāng)蘆葦纖維素分解菌數(shù)量較少時(shí)，可采用

 

增加其數(shù)量；在稀釋度數(shù)為10⁶倍下涂布了三個(gè)平板（每次取0.1mL），統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)分別為240、250、260，則稀釋前1mL菌液中所含細(xì)菌數(shù)為

 

個(gè)．
（4）獲取蘆葦纖維素分解菌后如要臨時(shí)保存，可將其接種在

 

上，等長(zhǎng)出菌落后放在

 

 的冰箱中保存．

Answer 1

考點(diǎn)：微生物的分離和培養(yǎng),培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用

專題：

分析：1、微生物接種的方法中最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，前者是指通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種，逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，后者是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)．
2、本題中要從土壤中獲得分解纖維素的菌．接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，平板劃線分離法：由接種環(huán)以菌操作沾取少許待分離的材料，在無(wú)菌平板表面進(jìn)行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開來(lái)，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落．
3、常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌．

解答： 解：（1）微生物的培養(yǎng)基成分有水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源、生長(zhǎng)因子等．滅菌方法有高壓蒸汽滅菌法、灼燒滅菌法等，培養(yǎng)基滅菌用高壓蒸汽滅菌法、金屬用具滅菌用灼燒滅菌法．
（2）篩選分解蘆葦纖維素的細(xì)菌，培養(yǎng)基中不能有除纖維素外的其他碳源．細(xì)菌計(jì)數(shù)可以先用稀釋涂布平板法接種后再統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)，然后計(jì)算細(xì)菌數(shù)．
（3）增加細(xì)菌數(shù)量可采用選擇培養(yǎng)基進(jìn)一步擴(kuò)大培養(yǎng)．三個(gè)平板平均每個(gè)有250個(gè)菌落，相當(dāng)于稀釋后每0.1mL有細(xì)菌250個(gè)，則稀釋前1mL中有250×10×10⁶個(gè)，即2.5×10⁹個(gè)．
（4）菌種保存可以用斜面固體培養(yǎng)基，溫度為4℃冰箱中．
故答案為：
（1）碳源、氮源 高壓蒸汽滅菌法 灼燒滅菌
（2）蘆葦纖維素作為唯一碳源 稀釋涂布平板法
（3）選擇培養(yǎng)（擴(kuò)大培養(yǎng)）  2.5×10⁹
（4）斜面固體培養(yǎng)基  4℃

點(diǎn)評(píng)：微生物這部分內(nèi)容是高考試題的一個(gè)熱點(diǎn)一般體現(xiàn)在對(duì)能源的利用，考察的知識(shí)點(diǎn)有微生物的無(wú)菌操作、微生物的分離以及產(chǎn)品的提取，注意總結(jié)．