Question

8．某實驗小組欲從豆油污染的土壤中篩選出能高效降解脂肪的菌株．請回答：
（1）在篩選過程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以豆油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）為避免培養(yǎng)皿污染，需將培養(yǎng)皿呈倒置狀態(tài)放置．為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過高，需將培養(yǎng)液進行稀釋處理．
（3）為了排除過程中的雜菌干擾，需設(shè)置接種等量無菌水的培養(yǎng)基作為空白對照．
（4）為了篩選出菌株，可將適量的蘇丹Ⅲ試劑滴加在平板中的菌落周圍，洗去浮色后，如果菌落周圍的現(xiàn)象是透明圈，則說明此種菌能夠分泌脂肪酶．
（5）純化菌種時，為了得到單菌落，可采用劃線分離法接種于新的平板上，然后用接種環(huán)挑取單菌落至空白斜面，最后置于冰箱中保存．

Answer 1

分析 （1）培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽．培養(yǎng)基的分類：①按物理性質(zhì)分，分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基中含有凝固劑，一般是瓊脂．②按化學(xué)成分分，分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)．兩者的區(qū)別是天然培養(yǎng)基成分不確定，合成培養(yǎng)基成分的含量是確定的．③按用途分，分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基．選擇培養(yǎng)基主要是培養(yǎng)、分離特定的微生物，培養(yǎng)酵母菌可在培養(yǎng)基中加入青霉素；鑒別培養(yǎng)基可以鑒定不同的微生物，比如鑒別飲用水中是否含有大腸桿菌，可以用伊紅-美藍培養(yǎng)基，如果菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤，說明有大腸桿菌．
（2）常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法．
培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學(xué)消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法．
（3）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個細菌繁殖而成的子細胞群體--菌落．

解答 解：（1）欲篩選出能降解豆油的菌株，培養(yǎng)基中應(yīng)只含有豆油而無其它碳源，不能降解豆油的細菌在此培養(yǎng)基上不能生存，從功能上講，這類培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）為避免培養(yǎng)皿污染，需將培養(yǎng)皿呈倒置狀態(tài)放置．為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過高，需將培養(yǎng)液進行梯度稀釋處理．
（3）為了排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響，需設(shè)置接種等量無菌水的培養(yǎng)基作為空白對照．
（4）由于脂肪遇蘇丹Ⅳ試劑會出現(xiàn)紅色，所以為了篩選出菌株，可將適量的蘇丹Ⅳ試劑滴加在平板中的菌落周圍，洗去浮色后，如果菌落周圍的現(xiàn)象是出現(xiàn)透明圈、不出現(xiàn)紅色圈，則說明此種菌能夠分泌脂肪酶．
（5）分離純化菌種時，需采用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，然后用接種環(huán)挑取單菌落至空白斜面，最后置于冰箱中保存，使聚集在一起的細菌細胞分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落，以便純化菌種．
故答案為：
（1）豆油    選擇    
（2）倒置   稀釋   
（3）過程中的雜菌干擾    等量無菌水
（4）蘇丹Ⅲ透明圈   
（5）劃線分離（涂布分離）     冰箱

點評 本題的知識點是微生物培養(yǎng)過程中的無菌技術(shù)，分離微生物的常用的接種方法和接種工具，主要考生能理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力．關(guān)鍵是運用所學(xué)過的知識點“透明圈”，進行知識點的遷移、類比，然后解決問題．