【題目】科學家通過誘導黑鼠體細胞脫分化獲得誘導性多能干細胞(iPS),繼而利用iPS細胞培育出克隆鼠。流程如下:

(1)從黑鼠體內(nèi)獲得一部分組織細胞,經(jīng)過___________消化,使其分散成單個的細胞,然后置于培養(yǎng)液中放入_________________中保溫培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中細胞保持生長、分裂直至出現(xiàn)_____________現(xiàn)象,就要進行傳代培養(yǎng)。

(2)下列關于動物細胞培養(yǎng)的敘述,正確的是___________(多選)。

A.在10代以內(nèi)的細胞大多具有正常的二倍體核型

B.某些癌細胞在合適條件下能逆轉(zhuǎn)為正常細胞

C.細胞克隆的最基本要求是必須來源于單個細胞

D.動物細胞培養(yǎng)液要添加血清等營養(yǎng)物質(zhì)

(3)圖中重組囊胚通過_________技術(shù)移入白鼠子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育?寺∈蟮倪z傳物質(zhì)主要來自圖中______鼠。為了提高成功率,代孕母鼠需進行激素處理,使其_____________

【答案】 胰蛋白酶(或膠原蛋白酶) CO2培養(yǎng)箱 接觸抑制 ABCD 胚胎移植 同期發(fā)情

【解析】試題分析:據(jù)圖分析,從黑鼠體內(nèi)獲得體細胞后,脫分化形成多能干細胞;從灰鼠體內(nèi)提取出2-細胞胚胎,經(jīng)過特殊處理形成囊胚,將多能干細胞移植到囊胚的內(nèi)細胞團,形成重組胚胎,移植到白鼠子宮,形成克隆鼠。

(1)從黑鼠體內(nèi)獲得組織細胞后,需要用胰蛋白酶處理,才能得到分散的單個細胞,然后置于培養(yǎng)液中放入CO2培養(yǎng)箱中保溫培養(yǎng)。培養(yǎng)的細胞在貼壁成長至鋪滿培養(yǎng)皿底時停止分裂,這種現(xiàn)象稱為細胞接觸抑制。

(2)在10代以內(nèi)的細胞一般遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變,具有正常的二倍體核型,A正確;細胞癌變是原癌基因和抑癌基因突變引起的;基因基因突變具有不定向的特點,如果癌細胞在合適的條件下發(fā)生基因突變,有可能使突變后的原癌基因或抑癌基因變成正常的基因,使細胞失去癌細胞的特點,B正確。一個克隆是指1個細胞經(jīng)培養(yǎng)形成的細胞群,多個祖細胞培養(yǎng)成的細胞群不是一個克隆,C正確;動物細胞培養(yǎng)液中為了保證營養(yǎng)全面,通常要在合成培養(yǎng)基的基礎上添加血清等營養(yǎng)物質(zhì),D正確。

小鼠胚胎干細胞可由囊胚的內(nèi)細胞團分離培養(yǎng)獲得.iPS與ES細胞具有胚胎細胞的特性,體積較小,細胞核大,核仁明顯;同樣具有發(fā)育全能性,有望在對人類iPS細胞進行定向誘導分化后用于疾病的細胞治療.克隆技術(shù)屬于無性繁殖,不能豐富生物的多樣性,生物沒有進化,

(3)圖中重組囊胚通過胚胎移植技術(shù)移入白鼠子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育,暫不移入的胚胎可使用冷凍方法保存克隆鼠的遺傳物質(zhì)主要來自圖中提供細胞核的黑鼠。為了提高成功率,代孕母鼠需進行激素處理,使其與供體黑鼠同期發(fā)情。

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(1)在上述實驗中,為了防止目的基因和pBV220載體在酶切后的末端發(fā)生任意連接,酶切時應選用的酶是______________________。目的基因的長度為______pb(重組質(zhì)粒上目的基因的插入位點與酶切位點之間的堿基對忽略不計)。pBV-IL1-His表達載體除了氨芐青霉素抗性基因(Ampr)、目的基因外還必須具有______________________等基因。

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(3)最后是通過________________技術(shù)來檢驗實驗是否成功。假設未檢測出目的蛋白,分析可能的原因有______________________________。(寫出一種即可)

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