Question

天然釀酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶類，用作發(fā)酵原料的淀粉需經(jīng)一系列復(fù)雜的轉(zhuǎn)化過程才能被利用。研究者從某絲狀真菌中獲取淀粉酶基因并轉(zhuǎn)入釀酒酵母菌，獲得的釀酒酵母工程菌可直接利用淀粉產(chǎn)生酒精。請回答下列問題：?

（1）將淀粉酶基因切割下來所用的工具是____，用____將淀粉酶基因與載體拼接成新的DNA分子，下一步將該DNA分子____，以完成工程菌的構(gòu)建。?

（2）若要鑒定淀粉酶基因是否插入釀酒酵母菌，可采用的檢測方法是____；若要鑒定淀粉酶基因是否翻譯成淀粉酶，可采用____檢測；將該工程菌接種在含淀粉的固體平板培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一定時間后，加入碘液，工程菌周圍出現(xiàn)透明圈，該現(xiàn)象發(fā)生的原因是____。

（3）如何進一步鑒定不同的轉(zhuǎn)基因工程菌菌株利用淀粉能力的大��？?
____。

（4）微生物在基因工程領(lǐng)域中有哪些重要作用？?
____。

Answer 1

（1）限制酶（限制性內(nèi)切酶） DNA連接酶 導(dǎo)入受體細胞

（2）DNA分子雜交技術(shù) 抗原—抗體雜交或淀粉酶活性 該工程菌產(chǎn)生的淀粉酶可分泌至培養(yǎng)基，水解淀粉后的區(qū)域，遇碘不再變藍色，產(chǎn)生透明圈

（3）測定相同培養(yǎng)條件下不同工程菌菌株的淀粉酶活性或酒精產(chǎn)量

（4）①工具酶主要來自微生物；②最重要的目的基因供體庫之一；③目的基因的載體之一；④作為受體細胞；⑤提供用于發(fā)酵的工程菌?

 基因工程操作的工具是限制性內(nèi)切酶、DNA連接酶和運載體；基因工程操作的步驟為提取目的基因——目的基因與運載體結(jié)合——將目的基因?qū)�入受體細胞——目的基因的檢測與表達。目的基因的檢測有多種手段，如①用基因探針對目的基因進行標記，然后在宿主細胞中檢測。②DNA分子雜交技術(shù)：利用被標記DNA單鏈與目的基因中的DNA鏈進行堿基互補配對的原理組成DNA雙鏈，如果雙鏈出現(xiàn)雜交帶就表明目的基因已導(dǎo)入。③抗原—抗體雜交技術(shù)：檢測目的基因是否能翻譯出蛋白質(zhì)，利用抗體對抗原的專一性。④全基因組PCR檢測（前提是宿主細胞沒有該基因）：看是否有目的基因上目的大小片段，再做瓊脂糖電泳鑒定。微生物在基因工程具有重要的作用，如獲取運載體，用來生產(chǎn)多肽藥物等。?