Question

18．欲利用基因工程技術將人胰島素基因轉入到小鼠基因組中，以期利用小鼠生產(chǎn)出人胰島素，請回答：
（1）若用逆轉錄的方法獲得人胰島素基因，則需要從人體相應的胰島β細胞細胞中提取mRNA，獲得的人胰島素基因經(jīng)過相應處理后，再利用顯微注射技術將其注入到受體細胞中，下列最不適合作為受體細胞的是B（A．受精卵B．胚胎干細胞C．第一次卵裂形成的細胞D．第三次卵裂形成的細胞）
（2）為獲得更多的受體細胞，可先對成年雌鼠注射激素進行超數(shù)排卵處理，將獲得的卵母細胞培養(yǎng)成熟，與經(jīng)獲能處理的精子結合形成受精卵后再進行后期操作．
（3）導入胰島素基因的受體細胞還需借助胚胎體外培養(yǎng)、胚胎移植等胚胎工程技術才能成為轉基因小鼠．

Answer 1

分析 1、基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、體外受精主要包括：卵母細胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精．
（1）卵母細胞的采集和培養(yǎng)
①主要方法是：用促性腺激素處理，使其超數(shù)排卵，然后，從輸卵管中沖取卵子．
 ②第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細胞或直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細胞．
（2）精子的采集和獲能
①收集精子的方法：假陰道法、手握法和電刺激法．
②對精子進行獲能處理：包括培養(yǎng)法和化學誘導法．
（3）受精：在獲能溶液或專用的受精溶液中完成受精過程．

解答 解：（1）胰島素基因只在胰島β細胞中才表達，因此若用逆轉錄的方法獲得人胰島素基因，則需要從人體相應的胰島β細胞中提取mRNA，獲得的人胰島素基因經(jīng)過相應處理后，再利用顯微注射技術將其注入到受體細胞中；受精卵的全能性最高，第一次卵裂形成的細胞和第三次卵裂形成的細胞都屬于全能細胞，因此相比較而言最不適合作為受體細胞的是胚胎干細胞．
（2）為獲得更多的受體細胞，可先對成年雌鼠注射激素進行超數(shù)排卵處理，將獲得的卵母細胞培養(yǎng)成熟，與經(jīng)獲能處理的精子結合形成受精卵后再進行后期操作．
（3）導入胰島素基因的受體細胞還需借助胚胎體外培養(yǎng)、胚胎移植等胚胎工程技術才能成為轉基因小鼠．
故答案為：
（1）胰島β細胞     B    
（2）超數(shù)排卵     獲能   
（3）胚胎體外培養(yǎng)     胚胎移植

點評 本題考查基因工程和胚胎工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)；識記胚胎工程的相關技術及其應用，能結合所學的知識準確答題．