【題目】為增加油菜種子的含油量，研究人員嘗試將酶D基因與位于葉綠體膜上的轉運肽基因相連，導入油菜細胞并獲得了轉基因油菜品種。

（1）研究人員依據(jù)基因的已知序列設計引物，采用 技術從陸地棉基因文庫中獲取酶

D基因，從擬南芥基因文庫中獲取轉運肽基因，所含三種限制酶（ClaI、SacI、XbaI）的切

點如下圖所示。則用 和 酶處理兩個基因后，可得到 端與

端（填圖中字母）相連的融合基因。

（2）將上述融合基因插入右上圖所示Ti質粒的T-DNA中，構建 并導入農桿菌中。將獲得的農桿菌接種在含 的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)得到含融合基因的單菌落，再利用液體培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng)，可以得到用于轉化的侵染液。

（3）剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時間，此過程的目的是 。

（4）進一步篩選后獲得轉基因油菜細胞，該細胞通過 技術，可培育成轉基因油菜植株。用 法在分子水平上可檢測轉基因油菜植株中的融合基因是否成功表達。

【答案】（1）PCR ClaⅠ DNA連接 A D

（2）基因表達載體（或“重組質粒”） 四環(huán)素

（3）利用農桿菌將融合基因導入油菜細胞 植物組織培養(yǎng)

（4）抗原—抗體雜交

【解析】（1）研究人員依據(jù)基因的已知序列設計引物，采用PCR法從陸地棉基因文庫中獲取酶D基因，從擬南芥基因文庫中獲取轉運肽基因．在上述引物設計時，分別在引物中加入如圖甲所示酶的識別序列，這樣可以用ClaⅠ限制酶和DNA連接酶處理兩個基因后，得到A、D端相連的融合基因．

（2）將上述融合基因插入圖乙所示Ti質粒的T-DNA中，構建表達載體即重組質粒并導入農桿菌中．將獲得的農桿菌接種在含四環(huán)素的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落，再利用液體培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng)，可以得到用于轉化的浸染液．

（3）剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時間，此過程的目的是利用農桿菌將融合基因導入油菜細胞，進一步篩選后獲得轉基因油菜．

（4）用抗原-抗體雜交法可檢測轉基因油菜植株中的融合基因是否成功表達．

練習冊系列答案
相關習題

科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】如下圖所示，請據(jù)圖回答下面的問題。

(1)淋巴細胞能與骨髓瘤細胞融合成一個細胞，兩種細胞膜也能 “融合”在一起，說明細胞膜[__________________________。此過程，常用__________________作為誘導劑，該細胞的特點是___________________________________________。

(2)雜交瘤細胞的體外培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基相比有何主要不同

_____________________________________________________________________。

(3)單克隆抗體注入體內后可以自動追蹤抗原(病原體或癌變細胞等)并與之結合，而絕不攻擊任何正常細胞，故稱為“生物導彈”，這是利用了______________________________________________。

(4)在單克隆抗體制備過程中，還應用了細胞工程中的__________________和__________________兩大技術。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】下列敘述不符合“形態(tài)結構與功能相適應”生物學觀點的是

A．根尖成熟區(qū)表皮細胞具有中央大液泡，有利于水分的吸收

B．內質網(wǎng)膜可與核膜、細胞膜相連，有利于細胞內物質的運輸

C．神經(jīng)元的突觸小體內含有較多線粒體，有利于神經(jīng)遞質的釋放

D．卵細狍體積較大，有利于提高與周圍環(huán)境進行物質交換的效率

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】生物試卷）對動物細胞某種細胞器的組成成分進行分析，發(fā)現(xiàn)它含有A、T、G、C、U5種堿基．主要由該細胞器完成的生理活動是（ ）

A．CO2+H2O→（CH2O）+O2

B．C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2O+能量

C．C6H12O6→2C2H5OH+2CO2+能量

D．DNA→RNA→蛋白質

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】下圖所示以DNA為模板轉錄RNA的過程圖解，圖中4、5表示兩種功能不同的酶。請根據(jù)圖分析回答下面的問題：

（1）在玉米的葉肉細胞，則能夠進行該生理過程的細胞結構有___________。

（2）轉錄過程中DNA首先在[ ]__________的催化作用下，由________提供能量，將DNA分子中堿基對內的____________斷開，該過程稱為________________。

（3）然后在［ ］_________的催化作用下，以其中的________鏈作為信息模板，以［ ］_________為原料，合成出[ ]___________。

（4）通過轉錄，DNA分子中的遺傳信息被準確地轉移到_______________中。

（5）在真核細胞的細胞核中，轉錄的產物通過_______進入細胞質中，與________結合在一起直接指導蛋白質的生物合成過程。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果膠使細胞壁破損。成熟的番茄果實中，PG合成顯著增加，能使果實變紅變軟，但不利于保鮮。利用基因工程減少PG基因的表達,可延長果實保質期�？茖W家將PG基因反向接到Ti質粒上，導入番茄細胞中，得到轉基因番茄，具體操作流程如下圖。據(jù)圖分析并回答下列問題：

（1）形成的PG反義質粒叫做_______________，它的構建過程是基因工程的核心，需要用到的工具酶有_____________。若已獲取PG的mRNA，可通過________ 獲取PG基因。

（2）重組質粒轉移到大腸桿菌中的目的是 ，要實現(xiàn)此目的，還可以用_________法。

（3）要獲取番茄的原生質體，通常要用到 酶。用含目的基因的農桿菌感染番茄原生質體后，可用含有 的培養(yǎng)基進行篩選。將其置于質量分數(shù)約為0．3g/ml的蔗糖溶液中，觀察細胞的 現(xiàn)象來鑒別細胞壁是否再生。

（4）由于導入的目的基因能轉錄出反義RNA，且能與 （“①天然的PG基因/②天然的PG基因轉錄的mRNA”填序號）互補結合，因此可抑制PG基因的正常表達。若觀察到番茄果實的保質期__________，則可確定轉基因番茄培育成功。

（5）將轉入反向鏈接PG基因的番茄細胞培育成完整的植株，還需要用 技術；其中，愈傷組織經(jīng)__________形成完整植株。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】人體組織水腫的原因之一可能是（　�。�
A.血漿中無機鹽含量少
B.組織液中蛋白質含量少
C.血液中尿素含量少
D.營養(yǎng)不良

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】

（1）用一定濃度的X溶液處理臨時裝片A，得到如圖C所示的結果，據(jù)圖判斷物質X進入細胞的方式應該為 。

（2）據(jù)圖C推測在整個實驗過程中，圖B所示細胞發(fā)生的形態(tài)變化是 。發(fā)生這些變化的條件為：

①植物細胞的 相當于一層半透膜，② 之間存在濃度差。

（3）為了更好地觀察植物細胞失水和吸水過程，通常選擇紫色洋蔥外表皮細胞作為材料，原因是 。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】下列哪一項不是染色體結構變異

A. 染色體片段顛倒 B. 染色體片段移接

C. 染色體片段的缺失或增加 D. 染色體數(shù)目增加

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