Question

【題目】科研人員在雜交瘤細胞的基礎(chǔ)上，獲得了雙雜交瘤細胞，能夠產(chǎn)生雙特異性抗體，該抗體可以同時結(jié)合兩種抗原。

（1）科研人員將抗原α、β分別注射到小鼠體內(nèi)，引起機體的__________免疫，__________分泌相應抗體。

（2）科研人員獲得上述小鼠的脾臟細胞，制備兩種雜交瘤細胞。每種雜交瘤細胞產(chǎn)生的抗體結(jié)構(gòu)、與抗原結(jié)合的情況如圖1所示。

①制備雜交瘤細胞時，需將上述小鼠的脾臟組織，用__________處理獲得單細胞后，再與小鼠的骨髓瘤細胞融合，篩選得到兩種雜交瘤細胞。將兩種雜交瘤細胞用__________試劑處理促進其融合，在培養(yǎng)基中加入__________（天然成分）培養(yǎng)。如果兩種細胞成功融合，則會同時表達出抗體的重鏈A、B和輕鏈a、b，這種細胞稱作雙雜交瘤細胞。

②抗體由兩條重鏈和兩條輕鏈組成，重鏈和輕鏈均分為恒定區(qū)和可變區(qū)，兩條重鏈依賴于A1或B1進行組裝（A1與B1相同），重鏈與輕鏈的組裝依賴于恒定區(qū)A2、a或B2、b（a與b相同）。因此，雙雜交瘤細胞產(chǎn)生的抗體種類較多，其中有一種抗體能同時與抗原α、β結(jié)合稱為雙特異性抗體，如圖2。請將A1、A2、B1、B2、a、b、α、β等字符填入下面的表格中__________。

1	2	3	4	5	6
A2				α

③為使雙雜交瘤細胞只產(chǎn)生圖2所示雙特異性抗體，降低純化分離成本，科研人員對重鏈、輕鏈的結(jié)構(gòu)進行改造。改造思路是在A、B、a、b的恒定區(qū)通過改變__________，進而改變蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，實現(xiàn)“榫卯”式互補組裝的唯一性，這種改造屬于現(xiàn)代生物技術(shù)中的__________工程。

（3）結(jié)合雙特異性抗體特點，請分析其在腫瘤治療方面的應用前景：________。

Answer 1

【答案】體液 漿細胞 ①胰蛋白酶 PEG（或“聚乙二醇”） 動物血清

1	2	3	4	5	6
A2	B2	a	b	α	β

③氨基酸種類（或“序列”） 蛋白質(zhì) 研制與腫瘤細胞和抗腫瘤藥物結(jié)合的雙特異性抗體，特異性殺死腫瘤細胞

【解析】

1、單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細胞，利用動物細胞融合技術(shù)將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，在經(jīng)過兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細胞群．兩次抗體檢測：專一抗體檢驗陽性，獲得能產(chǎn)生特異性抗體、又能大量增殖雜交瘤細胞，最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取單克隆抗體。

2、蛋白質(zhì)工程指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要。

（1）抗原進入小鼠體內(nèi)能夠引起機體的體液免疫，使?jié){細胞分泌抗體。

（2）①制備雜交瘤細胞，將小鼠的脾臟組織用胰蛋白酶處理獲得單細胞。動物細胞的融合需要使用PEG進行誘導，在加入動物血清進行培養(yǎng)。

②雙抗體是同時含有與抗原α、β結(jié)合的抗體由于1是A2，根據(jù)圖1的結(jié)構(gòu)3為a，2是B2,4是b，5是α，6是β。

即答案為：

1	2	3	4	5	6
A2	B2	a	b	α	β

③蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)是由氨基酸的種類和排列順序決定，所以可以通過改變氨基酸的種類和排列順序改變蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，屬于蛋白質(zhì)工程。

（3）雙抗體可以和兩種抗原結(jié)合，所以可以研制與腫瘤細胞和抗腫瘤藥物結(jié)合的雙特異性抗體，特異性殺死腫瘤細胞。