Question

【題目】微生物誘變后的篩選環(huán)節(jié)極為繁雜，定向篩選常用來篩選營養(yǎng)缺陷型突變株。無氮MM培養(yǎng)基(基本培養(yǎng)基)僅能滿足野生型菌株生長需要，該培養(yǎng)基中營養(yǎng)缺陷型菌株能存活但不能繁殖。CM培養(yǎng)基（完全培養(yǎng)基）可滿足營養(yǎng)缺陷型菌株營養(yǎng)需要。已知青霉素能抑制細菌細胞壁的合成，并在細菌的繁殖期起殺菌作用。據(jù)圖回答下列相關(guān)問題：

（1）據(jù)培養(yǎng)結(jié)果推測：1培養(yǎng)皿中是__________培養(yǎng)基，2培養(yǎng)皿中是_____________培養(yǎng)基。

（2）MM培養(yǎng)基濃縮缺陷型后需洗滌和稀釋，才能涂平板進行母皿CM培養(yǎng)，假設(shè)只進行101，102和103三級梯度稀釋，簡述從102倍稀釋獲得103倍稀釋的操作步驟：___________________________。

（3）MM培養(yǎng)基加靑霉素后培養(yǎng)能濃縮缺陷型的原因是______________________________。

（4）無氮MM培養(yǎng)基培養(yǎng)2小時的目的是__________________________________________。

Answer 1

【答案】CM(或完全） MM(或基本） 從102倍稀釋液的試管中吸取1mL稀釋液，注入裝有9mL無菌水的試管中搖勻（棄去1mL） 青霉素能抑制細胞壁的合成，野生型因能在MM培養(yǎng)基繁殖而被殺死，營養(yǎng)缺陷型因不能在MM培養(yǎng)基繁殖而被保留 耗凈營養(yǎng)缺陷型在CM培養(yǎng)基中吸收的營養(yǎng)物質(zhì)，保證誘變出的營養(yǎng)缺陷型不繁殖，防止營養(yǎng)缺陷型因繁殖遭誤殺

【解析】

【試題分析】

本題考查微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用的相關(guān)知識。由于青霉素能抑制細菌細胞壁的合成，野生型細菌生長繁殖活躍，合成細胞壁受阻而被殺死，缺陷型細菌處于休止狀態(tài)，不進行細胞壁的合成，將誘變處理后的存活個體培養(yǎng)在含有青霉素的基本培養(yǎng)基中，可以淘汰大部分野生型菌株而“濃縮”缺陷型菌株。閱讀題干和題圖可知，本題是選擇培養(yǎng)營養(yǎng)缺陷型菌株菌種的過程，梳理微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識，可根據(jù)問題的具體要求分析綜合做出解答。

（1）無氮MM培養(yǎng)基（基本培養(yǎng)基）僅能滿足野生型菌株生長，該培養(yǎng)基中營養(yǎng)缺陷型菌株能存活但不能繁殖。CM培養(yǎng)基（完全培養(yǎng)基）可滿足營養(yǎng)缺陷型菌株營養(yǎng)需要。根據(jù)圖中顯示1號培養(yǎng)基上微生物數(shù)目較多，2號培養(yǎng)基上微生物數(shù)目較少，可以推斷出1培養(yǎng)皿中是CM(或完全）培養(yǎng)基，2培養(yǎng)皿中是MM(或基本）培養(yǎng)基。

（2）假設(shè)只進行101，102和103三級梯度稀釋，簡述從102倍稀釋獲得103倍稀釋的操作步驟是：從102倍稀釋液的試管中吸取1mL稀釋液，注入裝有9mL無菌水的試管中搖勻（棄去1mL）。

（3）青霉素能抑制細菌細胞壁的合成，野生型菌株因能在MM培養(yǎng)基繁殖而被殺死，營養(yǎng)缺陷型菌株因不能在MM培養(yǎng)基繁殖而被保留，因此，MM培養(yǎng)基加靑霉素后培養(yǎng)能濃縮缺陷型。

（4）無氮MM培養(yǎng)基培養(yǎng)2小時的目的是耗凈營養(yǎng)缺陷型在CM培養(yǎng)基中吸收的營養(yǎng)物質(zhì)，保證誘變出的營養(yǎng)缺陷型不繁殖，防止營養(yǎng)缺陷型因繁殖遭誤殺。