Question

14．毛角蛋白Ⅱ型中間絲（KIFⅡ）基因與絨山羊的羊絨質(zhì)量密切相關(guān)．獲得轉(zhuǎn)KIFⅡ基因的高絨質(zhì)山羊的簡單流程如圖所示：

（1）在①過程中構(gòu)建的KIFⅡ基因表達(dá)載體時，最常用的運(yùn)載工具是質(zhì)粒；構(gòu)建成功的基因表達(dá)載體上，目的基因應(yīng)插入啟動子和終止子之間，以便成功表達(dá)．
（2）從基因文庫中獲得的KIFⅡ基因可用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，其原理是DNA雙鏈復(fù)制．
（3）通過②過程形成的成纖維細(xì)胞在培養(yǎng)過程中，將其置于含95%空氣加5%CO₂的混合氣體培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)中加入抗生素達(dá)到無菌環(huán)境．
（4）通過④過程獲得的卵（母）細(xì)胞，在與成纖維細(xì)胞形成重組細(xì)胞前，應(yīng)先通過顯微操作去掉細(xì)胞核．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示表示獲得轉(zhuǎn)KIFⅡ基因的高絨質(zhì)絨山羊的簡單流程圖，其中①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，該過程需要限制酶和DNA連接酶；②表示動物細(xì)胞培養(yǎng)過程，該過程需要采用胰蛋白酶處理組織塊以獲得單個細(xì)胞；③表示卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)過程．

解答 解：（1）基因工程中，運(yùn)載工具包括質(zhì)粒、噬菌體及動植物病毒等，其中質(zhì)粒是主要運(yùn)載工具；基因表達(dá)載體的組成包括啟動子、目的基因、標(biāo)記基因和終止子等，因此構(gòu)建基因表達(dá)載體時，目的基因應(yīng)該插入在啟動子和終止子之間，以便目的基因成功表達(dá)．
（2）用PCR技術(shù)可以在體外擴(kuò)增目的基因，其原理是DNA雙鏈復(fù)制．
（3）動物細(xì)胞培養(yǎng)需要一定的氣體環(huán)境，即95%空氣加5%CO₂的混合氣體；培養(yǎng)中加入抗生素可以防止雜菌污染．
（4）通過④過程獲得的卵（母）細(xì)胞，在與成纖維細(xì)胞形成重組細(xì)胞前，應(yīng)先通過顯微操作去掉細(xì)胞核．
故答案為：
（1）質(zhì)粒      啟動子     終止子
（2）PCR     DNA雙鏈復(fù)制
（3）5%CO₂        抗生素
（4）細(xì)胞核

點(diǎn)評 本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因山羊培育過程圖，考查基因工程、細(xì)胞工程和胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生識記所列知識要點(diǎn)，能準(zhǔn)確判斷圖中各過程的名稱，并能在較簡單的情境中使用，屬于考綱識記層次的考查．