Question

【題目】應(yīng)用現(xiàn)代生物技術(shù)可以大量獲得針對甲型H1N1病毒的抗體，并可用于臨床治療，如圖表示制備該抗體的設(shè)想，請據(jù)圖回答下列問題：

(1)在培育轉(zhuǎn)入甲型H1N1病毒抗體基因的牛的過程中，①過程需要的工具酶是__________________________________________，②過程常用的方法是______________。

(2)轉(zhuǎn)入甲型H1N1病毒抗體基因的牛可通過分泌乳汁來生產(chǎn)甲型H1N1病毒抗體，在基因表達(dá)中，甲型H1N1病毒抗體基因的首端必須含有__________，它是________________識別和結(jié)合的位點(diǎn)。③過程培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚階段，可以采用____________技術(shù)，培養(yǎng)出多頭相同的轉(zhuǎn)基因牛。

(3)prG能激發(fā)細(xì)胞不斷分裂，通過基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因可制備單克隆抗體，Ⅰ最可能是__________細(xì)胞，Ⅱ代表的細(xì)胞具有____________________________的特點(diǎn)。

(4)制備單克隆抗體也可以用動物細(xì)胞融合技術(shù)，與動物細(xì)胞融合過程不同，植物體細(xì)胞雜交在細(xì)胞融合之前要用______________________對細(xì)胞進(jìn)行處理，作用是除去______________。

Answer 1

【答案】 限制酶、DNA連接酶 顯微注射法 啟動子 RNA聚合酶 胚胎分割 漿 既能在體外大量增殖，又能產(chǎn)生專一抗體 纖維素酶、果膠酶 細(xì)胞壁

【解析】試題分析：題圖中①是基因工程中基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，②是將目的基因（甲型H1N1病毒抗體基因）導(dǎo)入受精卵，③是是胚胎移植過程。Ⅰ是導(dǎo)入了目的基因（prG）的受體細(xì)胞，Ⅱ是篩選既能無限增殖又能產(chǎn)生特定抗體的轉(zhuǎn)基因克隆細(xì)胞。

（1）由以上分析可知：①是基因工程中基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，需要先用限制酶切割目的基因和運(yùn)載體，后用DNA連接酶連接成重組DNA。將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法。

（2）基因表達(dá)載體包括啟動子、目的基因、標(biāo)記基因和終止子等，所以在甲型H1N5病毒抗體基因的首端必須含有啟動子。它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點(diǎn)，③是胚胎移植過程，移植前需將受精卵培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚時期再植入母體。因為來自同一胚胎的后代具有相同的基因型，所以要培養(yǎng)出多頭相同的轉(zhuǎn)基因奶牛，可以采用胚胎分割技術(shù)。

（3）只有漿細(xì)胞能分泌抗體，因此Ⅰ最可能是漿細(xì)胞(效應(yīng)B細(xì)胞)細(xì)胞。導(dǎo)入prG后漿細(xì)胞才具備無限增殖的能力，因此篩選出的Ⅱ細(xì)胞既能無限增殖又能產(chǎn)生特定抗體。

（4）植物體細(xì)胞雜交在細(xì)胞融合之前要用酶解法去細(xì)胞壁，即用纖維素酶和果膠酶對細(xì)胞進(jìn)行處理，以除去細(xì)胞壁。