A.該實(shí)驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基可以用苯磺隆、蔗糖等作為碳源

B.本實(shí)驗(yàn)的目的是探究能降解苯磺隆的物質(zhì)是否是該菌種所產(chǎn)生的蛋白質(zhì)

C.在微生物的接種實(shí)驗(yàn)中，用95%的酒精對(duì)實(shí)驗(yàn)者的雙手和超凈工作臺(tái)進(jìn)行消毒

D.該實(shí)驗(yàn)中，采集的土壤樣品經(jīng)高溫滅菌后，可以用于制取土壤稀釋液

A.圖中A細(xì)胞表示減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞核，B細(xì)胞表示去核體細(xì)胞

B.用物理或化學(xué)方法激活移植后的細(xì)胞，使其完成減數(shù)分裂過(guò)程

C.圖中過(guò)程X表示逆轉(zhuǎn)錄，獲得的cDNA可用于克隆豬基因組的測(cè)序

D.利用Bcl2cDNA/cDNA的比值可初步檢測(cè)Bcl2基因的轉(zhuǎn)錄水平

【題目】基因定點(diǎn)整合可替換特定基因，該技術(shù)可用于單基因遺傳病的治療。苯丙酮尿癥是由PKU基因突變引起的，將正常PKU基因定點(diǎn)整合到PKU基因突變的小鼠胚胎干細(xì)胞的染色體DNA上，替換突變基因，可用來(lái)研究該病的基因治療過(guò)程。定點(diǎn)整合的過(guò)程是：從染色體DNA上突變PKU基因兩側(cè)各選擇一段DNA序列HB1和HB2，根據(jù)其堿基序列分別合成HB1和HB2，再將兩者分別與基因、連接，中間插入正常PKU基因和標(biāo)記基因，構(gòu)建出如圖所示的重組載體。重組載體和染色體DNA中的HB1和HB2序列發(fā)生交換，導(dǎo)致兩者之間區(qū)域發(fā)生互換，如圖所示。

（1）構(gòu)建重組載體時(shí)，常用的工具酶有________。該實(shí)驗(yàn)用小鼠胚胎干細(xì)胞作為PKU基因的受體細(xì)胞以培育出轉(zhuǎn)基因小鼠，除了胚胎干細(xì)胞能大量增殖外，還因?yàn)榕咛ジ杉?xì)胞_________。

（2）為獲得小鼠的胚胎干細(xì)胞，可將小鼠囊胚中的_________取出，并用_________處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)過(guò)程中大部分細(xì)胞會(huì)貼附在培養(yǎng)瓶的表面生長(zhǎng)，這種現(xiàn)象稱為___________。

（3）用圖中重組載體轉(zhuǎn)化胚胎干細(xì)胞時(shí)，會(huì)出現(xiàn)PKU基因錯(cuò)誤整合。錯(cuò)誤整合時(shí)，載體的兩個(gè)中至少會(huì)有一個(gè)與一起整合到染色體DNA上。已知含有的細(xì)胞具有G418的抗性，、的產(chǎn)物都能把DHPG轉(zhuǎn)化成有毒物質(zhì)而使細(xì)胞死亡。轉(zhuǎn)化后的胚胎干細(xì)胞依次在含有G418及同時(shí)含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng)，在雙重選擇下存活下來(lái)的是__________的胚胎干細(xì)胞，理由是_________。

（4）將篩選得到的胚胎干細(xì)胞培育成小鼠，從個(gè)體生物學(xué)水平檢測(cè)，若小鼠__________，說(shuō)明PKU基因成功表達(dá)。

（1）基因型為mm的個(gè)體在育種過(guò)程中作為_________（填“父本”或“母本”），該個(gè)體與育性正常的非轉(zhuǎn)基因個(gè)體雜交，子代可能出現(xiàn)的基因型為__________。

（2）圖示的轉(zhuǎn)基因個(gè)體自交，F1的基因型及比例為__________，其中雄性可育（能產(chǎn)生可育的雌、雄配子）的種子顏色為_______。F1個(gè)體之間隨機(jī)授粉，得到的種子中雄性不育種子所占比例為________，快速辨別雄性不育種子和轉(zhuǎn)基因雄性可育種子的方法是_________。

（3）若轉(zhuǎn)入的基因D由于突變而不能表達(dá)，將該種轉(zhuǎn)基因植株和雄性不育植株間行種植，使其隨機(jī)授粉也能挑選出雄性不育種子，挑選方法是_______。但該方法只能將部分雄性不育種子選出，原因是___________。因此生產(chǎn)中需利用基因D正常的轉(zhuǎn)基因植株大量獲得雄性不育種子。

（1）圖 1 是葉肉細(xì)胞中部分碳代謝過(guò)程 ______________的模式圖。其中環(huán)形代謝途徑表示的是光合作用中的反應(yīng)。

（2）如圖 1 所示，在光合作用中 R 酶催化 C5 與 CO2 形成 2 分子 3-磷酸甘油酸。在某些條件下，R 酶還可以催化 C5 和 O2 反應(yīng)生成 1 分子 C3 和 1 分子 2-磷酸乙醇酸，后者在酶的催化作用下轉(zhuǎn)換為______后通過(guò)膜上的載體（T）離開(kāi)葉綠體。再經(jīng)過(guò)代謝途徑Ⅰ最終將 2 分子乙醇酸轉(zhuǎn)換為 1 分子甘油酸，并釋放 1 分子 CO2。

（3）為了減少葉綠體內(nèi)碳的丟失，研究人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將編碼某種藻類 C 酶（乙醇酸脫氫酶）的基因和某種植物的 M 酶（蘋果酸合成酶）基因轉(zhuǎn)入作物甲，與原有的代謝途徑Ⅲ相連，人為地在葉綠體中建立一個(gè)新的乙醇酸代謝途徑（圖 2 中的途徑Ⅱ）。

①將 C 酶和 M 酶的編碼基因轉(zhuǎn)入作物甲，能夠?qū)崿F(xiàn)的目的是：利用途徑Ⅱ，通過(guò) _______ ，降低葉綠體基質(zhì)中該物質(zhì)的含量，減少其對(duì)葉綠體的毒害作用。

②轉(zhuǎn)基因操作后，途徑Ⅲ能夠提高光合作用效率的原因是_______。

（4）在圖 2 所述研究成果的基礎(chǔ)上，有人提出“通過(guò)敲除 T 蛋白基因來(lái)進(jìn)一步提高光合作用效率”的設(shè)想。你認(rèn)為該設(shè)想是否可行并闡述理由___________。

（1）圖甲中四類細(xì)胞共有的細(xì)胞器是___________。能夠進(jìn)行光合作用的細(xì)胞是_______。

（2）用丙酮從甲圖Ⅰ細(xì)胞中提取脂質(zhì)，在空氣—水界面上鋪展成單分子層，測(cè)得的單分子層面積__________（填大于、等于、小于）細(xì)胞表面積的2倍。理由是__________。

（3）圖乙中具雙層膜的結(jié)構(gòu)有_________個(gè)，新轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA經(jīng)一系列加工后穿過(guò)核膜上的核孔轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞質(zhì)中。說(shuō)明核孔有___________功能。

（4）構(gòu)成生物膜的基本支架是____________，不同生物膜的功能不同，從生物膜的組成成分分析，其主要原因是__________。

（5）圖甲中的Ⅰ類細(xì)胞放在等滲的葡萄糖溶液中，則細(xì)胞的體積會(huì)______________（增大或減小或不變），為什么？__________________________________．若胰島素由n個(gè)氨基酸（平均相對(duì)分子質(zhì)量為m）形成的兩條肽鏈組成，則胰島素的相對(duì)分子質(zhì)量大約為____________________。

（6）用3H-亮氨酸(一次性提供一定量)標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)的分泌蛋白，追蹤不同時(shí)間具有放射性的分泌蛋白顆粒在細(xì)胞內(nèi)分布情況和運(yùn)輸過(guò)程，其中正確的是_______。

（1）請(qǐng)寫(xiě)出題干中未使用過(guò)的特異性免疫過(guò)程的 5 個(gè)術(shù)語(yǔ)（專有名詞）____________ 。

（2）目前已研發(fā)出針對(duì) PD-L1 的單克隆抗體（mAb），結(jié)合圖 1 信息，mAb 能治療腫瘤是因?yàn)槭褂?/span> mAb 時(shí)，mAb 通過(guò)與 ____________ 結(jié)合，阻止了____________結(jié)合，從而____________ 。

（3）臨床試驗(yàn)結(jié)果顯示，相同劑量的 mAb 對(duì)有的腫瘤患者治療有效，有的無(wú)明顯效果。請(qǐng)根據(jù)以上信息分析其可能的原因 ____________ 。

（1）在生物反應(yīng)堆中加入牛糞，其主要目的是提供______________，以加速秸稈的降解。打孔的目的是___________。

（2）表中的__________須通過(guò)細(xì)胞膜上的載體蛋白進(jìn)入番茄根尖細(xì)胞。

（3）與對(duì)照組相比，處理組提高了番茄生物量。從能量流動(dòng)的角度分析，表中可提高能量輸入番茄的直接因素是_________________________，可降低番茄能量輸出的直接因素是_____________________。

（1）同學(xué)甲進(jìn)行步驟④的操作，其中一個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖B所示。該同學(xué)的接種方法是_________，出現(xiàn)圖B結(jié)果可能的失誤操作是____________。純化菌株時(shí)，還可釆用平板劃線法。劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌，第二劃線區(qū)域的第一條線上無(wú)菌落，其它劃線上有菌落。造成劃線無(wú)菌落可能的操作失誤有____________。

（2）同學(xué)乙也按照同學(xué)甲的接種方法進(jìn)行了步驟④的操作：將lmL樣品稀釋100倍，在3 個(gè)平板上分別接入0．lmL稀釋液；培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為56、58和57。據(jù)此可得出每升樣品中的活菌數(shù)為____________個(gè)。

Ⅱ．貴州知名品牌“老干媽”系列產(chǎn)品一直沿用傳統(tǒng)工藝精心釀造，其中風(fēng)味豆豉深受大眾喜愛(ài)，遠(yuǎn)銷國(guó)內(nèi)外。風(fēng)味豆豉的主要工藝流程是：黃豆→洗凈浸泡→煮熟→加適量鹽→發(fā)酵→加入配料→裝壇密封→成品。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（3）制作豆豉前期發(fā)酵的目的是讓霉菌產(chǎn)生相應(yīng)的酶，如蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)樾》肿与暮桶被�酸，脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)?/span>______________，使豆豉營(yíng)養(yǎng)更加豐富，有利于健康。發(fā)酵過(guò)程中需采用人工培養(yǎng)純凈菌種，接種前隨機(jī)選取若干滅菌后的平板，先培養(yǎng)一段時(shí)間目的是_______________________________________。

（4）豆豉制成成品后，需測(cè)定其亞硝酸鹽含量，原理是在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與_____________發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成_____________色染料。

A.葉柄誘導(dǎo)愈傷組織實(shí)驗(yàn)的誘導(dǎo)率是指產(chǎn)生愈傷組織的葉柄數(shù)與實(shí)驗(yàn)的總?cè)~柄數(shù)之比

B.誘導(dǎo)葉片脫分化應(yīng)選擇的激素組合是

C.誘導(dǎo)幼芽生根實(shí)驗(yàn)表明幼芽生根過(guò)程中只有IAA發(fā)揮作用

D.探究誘導(dǎo)天然香果樹(shù)幼芽生根時(shí)，設(shè)計(jì)IAA的濃度梯度可為