(1)稀釋菌原液：為確定合適的稀釋倍數(shù)，小組成員取1 mL菌原液進(jìn)行如下圖所示的操作，在統(tǒng)計(jì)菌落時(shí)，發(fā)現(xiàn)平板上的平均菌落數(shù)為40個(gè)，則每毫升菌原液中的細(xì)菌數(shù)大約為________個(gè)。

(2)培養(yǎng)基的準(zhǔn)備：在對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌的過程中，完成加水、裝鍋、加熱排氣、保溫保壓適當(dāng)時(shí)間后，切斷熱源，讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降，________，打開排氣閥，旋開固定螺栓，開蓋，才可以取出滅菌的培養(yǎng)基等物品。待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)倒平板，在培養(yǎng)基凝固之前加入滅菌的剛果紅，從功能上來看，該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中碳源主要是________�！�

(3)接種與觀察：在無菌條件下，用________取0.1 mL稀釋后的菌懸液進(jìn)行圖1中________所示的操作，室溫放置2～3分鐘后倒置于恒溫箱中培養(yǎng)，室溫放置2～3分鐘的目的是__________________。培養(yǎng)過程中定期觀察菌落特征和透明圈的大小，圖2中D/d的值越________，表示該菌對(duì)纖維素分解能力越強(qiáng)。

（1）以Bt毒蛋白為有效成分的農(nóng)藥長期使用，會(huì)導(dǎo)致害蟲種群____，使藥效減弱直至喪失，無法在生產(chǎn)中繼續(xù)使用。

（2）以家蠶為材料，研究昆蟲抗藥性遺傳特性。測定生命力大致相同的多品種家蠶幼蟲致死50%的Bt濃度（LC50），結(jié)果如下：

1研究人員欲選擇敏感型和抗藥型家蠶為親本進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)，據(jù)上表結(jié)果，最好選擇家蠶品種是_______________。

②雜交實(shí)驗(yàn)及結(jié)果如下表：

實(shí)驗(yàn)一和實(shí)驗(yàn)二的結(jié)果表明，家蠶抗藥型是由位于____________染色體上的____性基因控制的；實(shí)驗(yàn)____的結(jié)果表明，F1產(chǎn)生兩種配子且比例為1：1

（3）Bt毒蛋白與家蠶幼蟲的中腸細(xì)胞特異性受體結(jié)合，使細(xì)胞膜穿孔，細(xì)胞裂解，幼蟲死亡。為從分子水平上闡明家蠶產(chǎn)生抗藥性的原因，研究人員從實(shí)驗(yàn)一親本________________細(xì)胞中提取總RNA，獲取cDNA，測定親本受體基因堿基序列如圖。

從分子水平推測家蠶抗藥性產(chǎn)生的原是敏感型受體基因中插入3個(gè)堿基對(duì)，導(dǎo)致____（填寫變異類型），進(jìn)而在受體蛋白中插入一個(gè)氨基酸（酪氨酸），受體蛋白結(jié)構(gòu)改變，使受體不能與Bt毒蛋白結(jié)合而產(chǎn)生抗藥性。

（4）依據(jù)Bt受體基因設(shè)計(jì)的靶向sgRNA，可以與限制酶Cas9結(jié)合，定點(diǎn)切除受體基因的39個(gè)核苷酸。sgRNA和Cas9mRNA的混合物注射到____型家蠶受精卵中，若其發(fā)育成的家蠶幼蟲表現(xiàn)為________，則進(jìn)一步證明上述推測成立。

（5）基因編輯技術(shù)能精確靶向修飾生物體基因組特定位點(diǎn)，人為改造生物體的遺傳信息。請從利或弊某一方面說明該技術(shù)的應(yīng)用是一把“雙刃劍”： ____。

A.當(dāng)體溫低于正常值時(shí)，正常人體冷敏神經(jīng)元的放電頻率一定高于熱敏神經(jīng)元的放電頻率

B.當(dāng)人體處于寒冷環(huán)境時(shí)，通過神經(jīng)--體液調(diào)節(jié)，減少散熱、增加產(chǎn)熱，使體溫恢復(fù)至正常

C.若人體感染流感病毒后體溫持續(xù)偏高，點(diǎn) S 將右移

D.正常人體處于炎熱環(huán)境中的散熱量大于在寒冷環(huán)境的中散熱量

（1）在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)之前，要對(duì)取自轉(zhuǎn)基因奶牛的組織進(jìn)行分離，形成單個(gè)細(xì)胞，這 一過程中需要利用_____酶處理，不能用纖維素酶與果膠酶的原因是_________________。

（2）形成重組細(xì)胞時(shí)應(yīng)選用_________期的卵母細(xì)胞，去掉其細(xì)胞核的原因是____________。

（3）如果重組細(xì)胞為貼附性細(xì)胞，則在進(jìn)行原代培養(yǎng)時(shí)，會(huì)表現(xiàn)出_____和_____等 特 點(diǎn) 。

（4）重組細(xì)胞在培養(yǎng)液中培養(yǎng)成的重組胚胎移入受體母牛體內(nèi)會(huì)生出與供體奶牛遺傳性狀大致相同的犢牛，但某些性狀上也會(huì)有差異，原因是__________________________________；__________________________________。

（5）上圖中所示的生物技術(shù)整體被稱為_____。轉(zhuǎn)基因奶牛的克隆成功，說明了動(dòng)物_____具有全能性。

（1）在生物體內(nèi)，抗體是由________細(xì)胞分泌的，該細(xì)胞可以來自____________增殖分化。

（2）傳統(tǒng)方法獲取抗體時(shí)，需要將相應(yīng)的抗原反復(fù)注射到動(dòng)物體內(nèi)，從動(dòng)物的血清中分離。顯然，這種方法產(chǎn)生的抗體量和純度等都很低特異性差，單克隆抗體的出現(xiàn)，克服了傳統(tǒng)抗體的不足，單克隆抗體是指________________。

（3）天然的抗體左右兩個(gè)V區(qū)結(jié)構(gòu)完全相同，只能結(jié)合相同的抗原。通過一定技術(shù)手段可以得到雙功能抗體(又叫雙特異性抗體)，它的兩個(gè)V區(qū)能結(jié)合不同的抗原。制備雙功能抗體的基本方法如下：將能分泌抗體1的雜交瘤細(xì)胞(A細(xì)胞)與能分泌抗體2的淋巴細(xì)胞(B細(xì)胞)進(jìn)行融合，形成可分泌兩種親代抗體和雜種抗體的雜種—雜交瘤細(xì)胞(A—B)。細(xì)胞融合時(shí)需要用_______________、聚乙二醇或電激等誘導(dǎo)，融合后總共應(yīng)該有______________種細(xì)胞(最多考慮兩兩融合)。

（4）雙功能抗體在癌癥治療中可作為“生物導(dǎo)彈”：用其中一個(gè)V區(qū)識(shí)別癌細(xì)胞表面_________，用另一個(gè)V區(qū)將T細(xì)胞等殺傷細(xì)胞定向帶到癌細(xì)胞所在的位置，這里，T細(xì)胞對(duì)癌細(xì)胞的攻擊屬于____免疫。

（5）細(xì)胞融合方法得到的雙功能抗體，只是將兩個(gè)不同抗體的V區(qū)集中到了一個(gè)抗體上，人們無法改變V區(qū)的結(jié)構(gòu)。通過____技術(shù)，可以對(duì)雙功能抗體的V區(qū)進(jìn)行設(shè)計(jì)改造，使其更適合人類的需要。這種改造，最終還必須通過對(duì)DNA分子的改造來完成。

（1）步驟①中，在核移植前應(yīng)去除卵母細(xì)胞的_____。小鼠體細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)， 所需氣體主要是 O2 和 CO2，其中 CO2 的作用是維持培養(yǎng)液（基）的_____。

（2）步驟②中，重組胚胎培養(yǎng)到_________期時(shí)，可從其內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離出 ES 細(xì)胞。體外培養(yǎng)條件下，ES 細(xì)胞在_____細(xì)胞上，能夠維持只增殖不分化的狀態(tài)。

（3）步驟③中，需要構(gòu)建含有 Rag2 基因的表達(dá)載體�？梢愿鶕�(jù) Rag2 基因的__________設(shè)計(jì)引物，利用 PCR 技術(shù)擴(kuò)增 Rag2 基因片段。PCR 過程需要經(jīng)過多次循環(huán)，每一個(gè)循環(huán)包括：加熱變性→冷卻復(fù)性→_____，其中冷卻復(fù)性的目的_________。用 HindⅢ和 PstⅠ限制酶分別在片段兩側(cè)進(jìn)行酶切獲得 Rag2 基因片段。為將該片段 直接連接到表達(dá)載體，所選擇的表達(dá)載體上應(yīng)具有_____酶的酶切位點(diǎn)。

（4）為檢測 Rag2 基因的表達(dá)情況，可提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的_____，用_______________的抗體進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。

（1）根據(jù)圖甲分析，要獲得最大持續(xù)捕撈量，捕撈后大黃魚種群數(shù)量應(yīng)處于__________點(diǎn)。用標(biāo)志重捕法調(diào)查大黃魚種群密度時(shí)，若標(biāo)記個(gè)體更易于被捕食，則種群密度的估計(jì)值__________（填“偏高”“偏低”或“不變”）。

（2）海洋魚類生活在不同的水層，這體現(xiàn)了生物群落的________結(jié)構(gòu)。新建碼頭的樁柱表面很快被細(xì)菌附著，隨后依次出現(xiàn)硅藻、藤壺、牡牡蠣等，該過程稱為_____________。

（3）圖乙表示某海域能量流動(dòng)簡圖，A、B、C、D表示生態(tài)系統(tǒng)的組成成分。圖中________和_________（填字母）在碳循環(huán)過程中起著關(guān)鍵作用；能量在第一營養(yǎng)級(jí)和第二營養(yǎng)級(jí)之間的傳遞效率為___________。

（4）海洋會(huì)受到石油、工業(yè)廢水、生活污水等污染。如果污染超過海洋生態(tài)系統(tǒng)的________________，海洋生態(tài)系統(tǒng)就很難恢復(fù)到原來的狀態(tài)。

（1）啟動(dòng)子的基本組成單位是____，終止子的功能是______________________。

（2）過程①的場所是____，過程①和過程②是____（同時(shí)/先后）進(jìn)行的。

（3）圖示表明，當(dāng)細(xì)胞中缺乏足夠的rRNA分子時(shí)，核糖體蛋白RP1能與mRNA分子上的RBS位點(diǎn)結(jié)合，從而導(dǎo)致mRNA____________________，終止核糖體蛋白的合成。這種調(diào)節(jié)機(jī)制既能保證細(xì)胞內(nèi)rRNA與核糖體在數(shù)量上的平衡，又可以____________________。

（4）大豆中的一種成分——染料木黃酮因能抑制rRNA形成而成為抗癌藥物的成分，試結(jié)合題中信息，分析染料木黃酮抗癌的機(jī)理：

①該物質(zhì)（染料木黃酮）可以抑制____的形成；

②____，進(jìn)而降低蛋白質(zhì)合成速率，抑制癌細(xì)胞的生長、增殖。

（1）質(zhì)粒載體作為基因工程的工具，應(yīng)具備的基本條件有_____（答出兩點(diǎn)即可），而作為基因表達(dá)載體，除滿足上述基本條件外，還需具有啟動(dòng)子和終止子。

（2）如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，在上述四種大腸桿菌細(xì)胞中，_________ 的細(xì)胞是不能區(qū)分的，其原因是二者均不含有氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均不生長；并且含有______________的細(xì)胞也是不能區(qū)分的，其原因是________。在上述篩選的基礎(chǔ)上，若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌的單菌落，還需使用含有_____的固體培養(yǎng)基。

（3）基因工程中，某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體，其 DNA 復(fù)制所需的原料來自于___________。

A.①是纖維素酶和果膠酶，②是融合的原生質(zhì)體

B.②到③過程中高爾基體活動(dòng)明顯增強(qiáng)

C.將愈傷組織包埋在人工種皮中，就形成了人工種子

D.④長成的植株需要選擇的原因是有耐鹽高產(chǎn)和耐鹽不高產(chǎn)兩種