Question

【題目】由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人將地衣芽孢桿菌的 α-淀粉酶 基因轉(zhuǎn)入酵母菌中經(jīng)篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種（過程如圖甲所示）。

（1）圖甲中，過程①需要的酶有_____________ 。為達(dá)到篩選目的，平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基應(yīng)以____________ 作為唯一碳源。②、③過程需要重復(fù)幾次，目的是______________ 。

（2 ）某同學(xué)嘗試過程③的操作，其中一個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示。該同學(xué)的接種方法是_____________________ ；推測該同學(xué)接種時(shí)可能的操作失誤是______________ 。

（3 ）以淀粉為原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的適宜條件下密閉發(fā)酵，接種________菌的發(fā)酵罐需要先排氣，其原因是__________________________ 。

（4 ）用凝膠色譜法分離α 一淀粉酶時(shí)，在色譜柱中移動(dòng)速度較慢的蛋白質(zhì)，相對(duì)分子質(zhì)量較________ 。

Answer 1

【答案】（1）限制性核酸內(nèi)切酶、DNA 連接酶 淀粉 進(jìn)一步篩選純化獲得分解淀粉能力強(qiáng)的酵母菌

（2 ）稀釋涂布平板法 涂布不均勻 （3 ）工程酵母 工程菌分解淀粉產(chǎn)生葡萄糖的能力強(qiáng)，導(dǎo)致酒精發(fā)酵產(chǎn)生CO2的速率更快 （4 ）小

【解析】

(1)由題目所給信息可以直接看出，工程酵母菌比普通酵母菌利用淀粉的能力強(qiáng)；在以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基上，工程酵母菌可以正常增殖，而普通酵母菌不能正常增殖。（2）圖示菌體過于集中，是菌液中酵母菌分布不均造成的，應(yīng)通過搖晃，使培養(yǎng)液中的酵母菌分布均勻。（3）在以淀粉為原料的培養(yǎng)液中，普通酵母菌繁殖慢，產(chǎn)生氣體少；工程酵母菌繁殖快，產(chǎn)生氣體多。（4）大分子物質(zhì)由于直徑較大，不易進(jìn)入凝膠顆粒的微孔，而只能分布顆粒之間，所以在洗脫時(shí)向下移動(dòng)的速度較快。小分子物質(zhì)除了可在凝膠顆粒間隙中擴(kuò)散外，還可以進(jìn)入凝膠顆粒的微孔中，即進(jìn)入凝膠相內(nèi)，在向下移動(dòng)的過程中，從一個(gè)凝膠內(nèi)擴(kuò)散到顆粒間隙后再進(jìn)入另一凝膠顆粒，如此不斷地進(jìn)入和擴(kuò)散，小分子物質(zhì)的下移速度落后于大分子物質(zhì)，從而使樣品中分子大的先流出色譜柱，中等分子的后流出，分子最小的最后流出。